抑制survivin基因地表达对骨肉瘤细胞株U-2OS凋亡地影响.PDFVIP

临床与病理杂志 2015, 35(5) 834 J Clin Path ol R e s doi: 10.3978/j.issn.2095-6959.2015.05.028 View this article at: /10.3978/j.issn.2095-6959.2015.05.028 抑制survivin基因的表达对骨肉瘤细胞株U-2OS凋亡的影响 张文韬，段宁，程辉光，宋涛，杨团民，同志超 (西安市红会医院骨科，西安 710054) [摘　要] 目的：观察抑制sur v iv in 基因表达后对骨肉瘤细胞株 U-2OS 凋亡的影响。 方法：下调骨肉瘤细胞 株U-2OS 中sur v iv in 的表达，并采用免疫印迹法(western blot)和逆转录聚合酶链反应 (RT-PCR)检 测U-2OS 细胞株中sur vivin 的蛋白和mRNA 表达；同时采用甲基偶氮哇盐 (MTT)法、流式细胞术和 western blot 检测下调survinin对化疗药物顺铂增加细胞凋亡和减少存活率作用的影响，并探讨其对 抗凋亡分子Bcl-2 以及促凋亡分子Bax 的蛋白表达的作用。结果：survivin-siRNA成功转染U-2OS 细胞 株后，western blot 和RT-PCR检测结果均显示U-2OS 细胞株中sur vivin 的蛋白和mRNA 表达水平显著 低于空白对照组 (P 0.05) ；MTT 比色法结果显示下调sur vivin 可促进化疗药物顺铂对U-2OS 细胞株 存活率降低及生长抑制率增加的作用；western blotting 检测结果表明，与空白对照组相比，Bcl-2 的 蛋白表达显著减少 (P 0.05) ，而Bax 的蛋白表达显著增加(P 0.05) 。结论：下调sur vivin基因表达可 促进骨肉瘤U-2OS 细胞株的凋亡，并增加其对化疗药物顺铂的敏感性，为以sur vivin作为靶基因治 疗骨肉瘤提供实验依据。 [关键词] survivin ；siRNA ；肉骨瘤细胞株U-2OS ；化疗敏感性 Blockade of survivin promotes the apoptosis of human osteosarcoma cell line U-2OS ZHANG Wentao, DUAN Ning, CHENG Huiguang, SONG Tao, YANG Tuanmin, TONG Zhichao (Department of Orthopedics, Xi’an Red Cross hospital, Xi’an 710054, China) Abstract Objective: To investigate the effect of surviving on the apoptosis of human osteosarcoma cell line U-2OS. Methods: After transfection with small inference RNA targeting survivin in U-2OS, survivin protein and mRNA expression were measured with western blot and RT-PCR, respectively. U-2OS cells were knoc