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凯基 细 胞 生 物 学 生物 31 凯基 生物 细 胞 生 物 学 Caspase系列单项检测(KGSA003) 实验目的:通过caspase活性检测鉴定样本的凋亡情况 实验原理:将caspase序列特异性的多肽底物偶联至发色基团,当该底物被Caspase剪切后, 发色基 团即游离出来,可通过酶标仪或分光光度计测定其吸光值,考察caspase的活化程度。 试剂:Caspase分光光度法检测试剂盒等 仪器:低温高速离心机、酶标仪、孵育箱等 实验内容与方法: 1. 提取样品蛋白并定量 2. 加入Caspase Substrate避光孵育 3.酶标仪测定吸光值 4.计算Caspase活性 客户提供实验信息: 1、 实验信息(客户提供):样品信息 (包括来源等)指标名称 2、实验材料提供 5 (1)样本材料:新鲜或冷冻细胞不少于5×10个,新鲜或冷冻组织样本不少于50 mg (2)试剂:采用凯基Caspase分光光度法检测试剂盒。或可按客户要求代订其它品牌公司试剂。 服务周期:2周至3周(具体视样品数而定) 结果提交:提交实验报告书(包括实验材料、试剂、仪器、实验过程方法、结果及分析)、原始数 据、图片,文本或电子版。 收费标准:蛋白提取、定量:80元/样品;Caspase活性检测: 100元/样品 线粒体膜电位检测(JC-1)(KGSA004) 实验目的:通过检测线粒体膜电位变化鉴定样品的凋亡情况 实验原理:JC-1为阳离子脂质荧光染料,有单体和多聚体两种存在状态,两者的发射光谱不同。正 常健康线粒体的膜电位(△ψ)具有极性,JC-1依赖于△ψ的极性被迅速摄入线粒体内,并因浓度增高 而在线粒体内形成多聚体,多聚体发射光为红色荧光;而细胞发生凋亡时,线粒体跨膜电位被去极化, JC-1从线粒体内释放,红光强度减弱,以单体的形式存在于胞质内,发绿色荧光。 试剂:细胞凋亡线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)等 仪器:涡旋仪、低温高速离心机、流式细胞仪、荧光显微镜等 实验内容与方法: 1. 收集细胞并用PBS清洗两遍 2. 加入 JC-1工作液孵育 3. 荧光显微镜观察或流式细胞仪分析 客户提供实验信息: 1、实验信息(客户提供): 样品信息 (全称、来源等) 正常A549细胞JC-1检测 2、实验材料提供 5 (1)样本材料:新鲜细胞不少于2×10 个 (2)试剂: 凯基细胞凋亡线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1) 服务周期:1周以内(具体视样品数而定) 结果提交:提交实验报告书(包括实验材料、试剂、仪器、 实验过程方法、结果及分析)、原始数据、图片,文本或电子版。 收费标准:线粒体膜电位检测 100元/样品 A549细胞经紫杉醇(10nM)诱导JC-1检测 32

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