多溴联苯免疫PCR人工抗原的合成及表征.pdfVIP

环境化学 第27 卷第5 期 Vol. 27 , No. 5 2∞8 年 9 月 ENVIRONMENTAL CHEMISTRY September 筑泊S 多滇联苯免疫 PCR 人工抗原的合成及表征* 陈寒玉1 ， 2 庄惠生1υ 。 东华大学环境科学与工程学院，上海， 201620; 2 平顶山工学院环境工程系，平顶山， 467∞υ 搞要通过保留多漠联苯苯环和在苯环上古人氨基取代基和竣基取代基，得到两种多漠联苯半抗原.然 后用重氮化法和活化器法，把学抗原分别与牛血清蛋白偶联，合成了两种人工免疫原，抗原结合比为1:17 和 1: 19. 以此免疫原免疫新西兰大白兔，双向琼躇扩散方法测定血清效价可达 1: 32-1: 64. 关键词多漠联苯，免疫PCR，抗原，合成，表缸. 当前，免要监测的研究主要关注在直接或间接爵联免疫的检拥方法.fE!.酶联免痊法的检割援和灵 敏度低于传统的色谱分析方法.免疫-PCR 作为一种高灵敏度的免在监捷方法，近几年在临床医学研 究领域得到了快速的发展和深入的研究.程已成为一种成熟的医学和生物撞揭方法[1 -5J 免疫-PCR 和 E口SE 方法裙比，其灵敏度可以提高 I∞-10∞0 错[IJ 本文介绍一种制备多漠联苯人工抗累的合成方法，合成到种多漠联苯单体揭免疫原，并用于新西 兰大自兔的免疫. 1 实验部分 1. 1 合成路线 以 4 ， 4'-二漠联苯为原料，经过硝化、还原，与牛血清白蛋自(BSA) 镇联，合成两种人工全拉 原.两种多摸联苯抗原的合成路线如下: βopρα::各 , } 1 .. 、 ρ〈αXF乒μ鸟ρ-c(〈议叉8:: f「口4气‘i O>/\,,ff,, BρβI议叉λ& JιH叭町2乒P2乌L 二户ρC众X;γN栩……只←…一唱划部拟A?ρ〈仪X仁 两种二澳联苯半抗累的合成路线参克文献[2J. 1. 2 3-氨基二漠联苯全抗累的合成 称取O.lmmol (0. 326g) 3-氨基二滇联苯，加入 lml 浓 HCl 和5n追求，主日热禧解，童于冰浴(4'(; 以亨)中低温搅拌下滴人4ml 30% 的 NaN0 水落攘.继续反应 30 min，如少量尿素除去未反应的 2 NaN0 • 将O. lmmol BSA 痞于40ml 联酸盐缓冲搭攘(pH 9. 码，逐漓加入上述重氨盐，逐渐有橙红色 2 摇滚出现，继续反应2 h ，得抗原桓品.将反应接装A透斩袋，置于0.9% 生理盐水中透析妇，每天 换水2l史，经萦外可见分光光度计扫描鉴定后，分装冻存. Z棚年2 月 24 日收稽. 事国家自然科学基金 (20677∞的项吕资助. ..通讯联系人， E-mail: hszhuan授dh且-edu. cn