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从家系群体中挖掘与目的性状相关的功能基因

从家系群体中挖掘与目的性状相关的功能基因 根据目的性状,利用显著多态性的亲本,构建性状分离群体如F 、回交群体BC 、重组 2 自交系RIL、双单倍体系DH 等。利用这些遗传作图群体,可以构建遗传图谱并进行连锁分 析定位数量性状基因(QTL )。 (1) 遗传图谱构建—连锁分析 对双亲及子代进行全基因组重测序或简化基因组测序,获得SNP 标记,应用生物信息 学手段分析每个材料 SNP 的亲本来源 (来自父本或者母本),对这些 SNP 位点进行基因分 型,最终将子代群体中每个单株的各染色体的每个片段来源进行解析,得到每个材料高精度 的基因分型图,构建最新一代高密度遗传图谱,结合目标性状表型进行 QTL 定位。 技术路线: 作图群体双亲和子代测序 双亲间高可信度多态SNP检测 作图群体子代基因分型 遗传图谱构建 表型 QTL定位 图1 遗传图谱构建进行QTL 定位 案例解析: The genome of pear (Pyrus bretschneideri Rehd.).Genome Research.2012 Wu J, Wang Z, Shi Z, et al. The genome of the pear (Pyrus bretschneideri Rehd.). Genome research, 2013, 23(2): 396-408. • 样本选取: – 八月红和砀山酥梨杂交得到的F1 ,群体大小为102 个 • 测序策略: – 砀山酥梨进行基因组组装, – 八月红和F1 子代样本RAD 测序,平均每个样品测序量为1Gb. • 分析结果: – 利用八月红和砀山酥梨杂交得到的F1 群体,构建了一张含有2005 个标记的遗传图 谱,共17 个连锁群,将75.5%的序列锚定到了遗传图谱上; (2 ) 物理遗传图谱 (Bin map )构建—连锁分析 通过对作图群体亲本进行高深度全基因组重测序,子代进行低深度测序,将一定数量的 连续SNP 作为判断染色体重组事件的最小单位(recombination bin ),判断子代每个bin 来源 于父母本的情况,得到每个子代的全基因组物理重组图谱,并构建Bin Map ;可用于后续的 连锁图谱构建和QTL 定位。 技术流程: 作图群体双亲 和子代测序 双亲间高可信 度多态SNP检测 判断作图群体 子代bin来源 Bin Map构建 表型 QTL定位 图2 物理遗传图谱构建技术路线 案例解析: Huang X, Feng Q, Qian Q, et al. High-throughput genotyping by whole-genome resequencing. Genome Research, 2009, 19(6): 1068-1076. • 样本选取

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