油茶饼中茶皂素及蛋白质的提取分离研究.pdfVIP

摘 要 本课题以油茶饼粕为原料，主要研究了油茶饼中茶皂素的提取、分离、纯化的最 佳工艺及测定茶皂素的方法，并对油茶饼中蛋白质的提取及功能特性进行了研究，为 茶皂素的工业生产提供了理论基础，并对提高油茶饼的综合资源利用具有重要意义。 1．油茶饼粕中主要营养成分：总糖35.19%、脂肪 6.19%、蛋白质 8.12%、粗纤 维 18.67%、茶皂素 12.11%。 2. 通过薄层层析（TLC ）对油茶饼提取物进行定性试验，发现提取物中在于茶 皂素对照品同样 R 值的位置出现了相同的斑点，R 值为 0.37，说明油茶饼粕中含有 f f 茶皂素。 3. 采用甲醇为提取剂，通过超声波辅助法提取油茶饼粕中的茶皂素。以茶皂素 的提取效率为考察指标进行二次通用旋转组合试验。研究表明：提取时间对茶皂素提 取效率影响最大，其次是料液比，提取温度对茶皂素提取效率影响最小，最佳提取工 艺为料液比1:9、超声温度50℃、超声提取时间57min为超声波辅助提取茶皂素的最佳 工艺条件，此条件下茶皂素提取效率可达到80.89%。 4. 建立高效毛细管电泳法，检测茶皂素的条件为：BECKMAN 高效毛细管电泳 仪，PDA 检测器。未涂层熔融石英毛细管柱 （i.d.50um×60cm，有效长度 50cm ）。运 行缓冲液为 30mM 硼酸硼砂溶液，pH=8.0 ，进样时间 5s，毛细管柱温为25 ℃，分离 电泳电压为20KV ，检测波长为210nm 。并与香草醛浓硫酸分光光度法进行比较，结 果表明高效毛细管电泳法不易受其他杂质影响，精确度较高。 6. 分别用大孔树脂和聚酰胺树脂对茶皂素进行分离纯化，并考察这两种方法的 洗脱剂浓度，分别用 70%和 50%乙醇进行洗脱，两种分离纯化方法所得目的物纯度 为：83.23%、80.17%。 7. 采用碱提酸沉法提取油茶饼粕中的蛋白质，以蛋白质的提取率为考察指标进 行正交试验。最佳提取工艺为：提取温度为45 ℃、pH 值为 11.5、料液比 1:45 的条件 下提取 90min 。在此条件下得到蛋白提取率为44.19% 。 8. 对油茶蛋白质进行功能特性测定。结果可知：吸油性为4.0ml/g、乳化性 36%、 乳化稳定性为 55%、起泡性 60% 。 关键词：油茶饼，茶皂素，蛋白质，提取，毛细管电泳 I Abstract This subject is based on the Camellia oleifera seed cake as the raw material. We mainly study the best technology of the extraction, separation, and purification of the tea saponin in the Camellia oleifera seed cake and the determination method of the tea saponin. And we makes a study of the extraction, separation and the function characteristics of the protein in the Camellia oleifera seed cake. It provides a theoretical basis for the industrial production of the tea saponin. And it has important significance to improve the comprehensive resource utilization. 1. Main nutrients in the Camellia oleifera seed cake: Total sugar 35.19%, fat 6.19%, protein 8.12%, crude fiber 18.67%,