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DPPH法测定黄芩黄酮的抗氧化活性
抗氧化就是任何以低浓度存在就能有效抑制自由基的氧化反应的物质，其作用机理可以是直接作用在自由基，或是间接消耗掉容易生成自由基的物质，防止发生进一步反应。
目前对自由基清除剂的研究方法主要有2类，一类是体外模型，另一类是体内模型，其中DPPH法是体外模型中最常用的方法。
DPPH又称1,1-二苯基-2-三硝基苯肼无水乙醇溶液呈紫色，在51波长处有最大吸收，吸光度与浓度呈线性关系
DPPH与抗氧化剂反应原理
材料：DPPH（1,1-二苯基-2-三硝基苯肼
DPPH贮备液的制备
准确称取DPPH试剂3．5mg，用无水乙醇溶解，并定量转入10mL容量瓶中，用无水乙醇定容至刻度，取2mL至100ml容量瓶中，摇匀得浓度为0.0178mmol／L DPPH贮备液，置于冰箱中冷藏备用。
试液的制备(只作参考)
准确称取5.2mg干燥的黄酮提取物（32.75%）,用无水乙醇溶解，并定量转入50ml容量瓶中，用无水乙醇定量至刻度，取10ml至100ml容量瓶中，摇匀得浓度为0.0233mmol／L试液。
3.DPPH·清除率的测定
在10mL比色管中依次加入4.0mLDPPH溶液和黄酮提取液，再加入无水乙醇至刻度，混匀立即用1cm比色皿在517nm波长处测吸光值(A)，吸光值记为Ai，再在温室避光保存30min后测吸光值，记为Aj，对照试验为只加DPPH的乙醇溶液，其吸光值记为Ac。按下式计算自由基清除率(K)：
K(%)=[1-(Ai-Aj)/Ac]*100%
试验重复三次，取其平均值作为最后结果。
[1].刘玉萍,Purusotam Basnet,小松かっ
药品：DPPH（1,1-二苯基-2-三硝基苯肼 北京诺博莱德科技有限公司DPPH稳定性不好，要用时新鲜配制浓度要根据样品的活性来定，一般在20-100μg/mL添加DPPH量与样品量比例，是根据样品抗氧化能力，而定的！
分子量:394.32
样品+DPPH的读数太大，表明你加进去的样品的抗氧化活性较低，可考虑加大样液的浓度试试IC50值为样品提取液抑制DPPH的吸光度50%时提取物的浓度
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