2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体.ppt

(4)在培养时通过________分裂方式大量繁殖。D细胞体外培养需要注意的条件是（要求答5项）__________________________________。 （5）单克隆抗体在疾病的诊断、治疗和预防方面，与常规抗体相比，其特点是_________________。 特异性强、灵敏度高 有丝 无菌、无毒的环境；充足的营养；适宜的温度和pH；适宜的气体环境 15、（1）单克隆抗体是指 。 （2）制备单克隆抗体的步骤： ①将__________注入小鼠体内，从小鼠脾脏中获得淋巴细胞，其中至少1个淋巴细胞带有抗该抗原的抗体。 ②将步骤①获得的B淋巴细胞与步骤②培养的骨髓瘤细胞在_________________的诱导下融合。 ③将诱导后产生的多种细胞，放在_______培养基的多孔培养板上培养，筛选。 ④这样获得的杂交瘤细胞既具有B淋巴细胞_____________的能力，又具有________________的本领。 ⑤检测和分离带有抗X抗体的阳性细胞，培养板中每孔放一个细胞进行培养。 ⑥将阳性细胞进行增殖，从而制备出大量抗该抗原的单克隆抗体。 化学性质单一，特异性强的抗体 抗原 聚乙二醇 选择性 无限增殖 产生专一抗体 （3）大量制备单克隆抗体的方法主要有两种： ①体外培养法，可获得10μg/mL的抗体；②动物体内诱生法可获得5~20mg/mL的抗体。你选择的方法及原因是 。 （4）用本法制备出的单克隆抗体仍具有局限性，因为它是用小鼠的_______细胞制备的，其化学本质是___________，应用于人体，会作为 产生 ，解决这个问题的方法是_____________________________。 大量生产选①，小规模生产选② 效应B 蛋白质 异物 免疫反应 采用人的效应B细胞制备 15、右图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案。据图回答：　　（1）该方案能达到预期效果吗？　　　。原因是　　　　 ______________________________________________。　　（2）图中②为　　 　过程，常用　　　 　作为诱导剂。该细胞继承了_____________________　 　，因此不仅能分泌　　___________，还有　　 　　本领。 不能 没有将抗原注入小鼠体内，无法获得产生专一抗体的B淋巴细胞 细胞融合 灭活病毒 双亲细胞的遗传物质 特异性抗体 大量增殖 制备单克隆抗体 （3）该方案的目的是_________________________。 * (1) (1) (2) (3) (4) (5) 植物体细胞杂交过程示意图 A细胞 B细胞 人工诱导 1.1动物细胞融合的概念 杂交细胞 动物细胞融合（也称细胞杂交）：是指两个或多个细胞融合形成一个单核细胞的过程。 一、动物细胞融合 细胞膜的流动性 灭活病毒、PEG、电激等 融合后的细胞进行有丝分裂，形成完整的杂交细胞 诱导的手段？ 融合后细胞的类型？ AB杂种细胞遗传物质 有什么特点？ 三种AA、AB、BB（A、B） 含两种生物的遗传物质 1.2动物细胞融合过程 原理？ 1.2动物细胞融合过程 为什么灭活的病毒能作诱导剂？ 灭活丧失感染性 保留融合活性 因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合 1.3动物细胞融合技术的意义和应用 比较项目 细胞融合的原理 细胞融合的方法 诱导手段 用途 植物体 细胞杂交 细胞膜的 流动性 纤维素酶、 果胶酶去除 细胞壁后诱 导原生质体 融合 离心、电刺 激、振动、 聚乙二醇 克服远源 杂交不亲 和，获得 杂种植株 动物细 胞融合 细胞膜的 流动性 用胰蛋白酶 使细胞分散 后诱导细胞 融合 除应用植物 细胞杂交手 段外，还有 灭活病毒 获得杂种细胞、制备 单克隆抗 体 1.4 比较动、植物细胞杂交技术 【例1】能使动物细胞融合的特有的诱导因子是 （ ） A.离心 B.灭活的病毒 C.电刺激 D.振动 【例2】融合后的杂交细胞的遗传物质有何特点（ ） 具有原来两个或多个细胞的遗传信息 B.能无限增殖 C.可形成新个体 D.培养过程会贴壁 【例3】动物细胞融合的作用中最重要的是（ ） A.克服远源杂交不亲和 B.制备单克隆抗体 C.培育新物种