HBeAg和P53突变在肝癌发生中的作用论文.docVIP

　　HBeAg和P53突变在肝癌发生中的作用论文 【摘要】目的：探讨血清HBeAg和肝癌组织中P53突变的关系及其在肝癌发生中的作用.方法：应用ELISA法检测血清HBeAg，PCR结合直接测序检测P53突变.同时分析相关临床病理因素.结果：在42例患者中HBeAg阳性者20例，占47.6%;P53突变25例，占59.5%;HBeAg阳性同时伴有P53突变者16例.HBeAg的表达情况与肿瘤数目（P=0.002）、分化程度（P=0.025）、复发（P=0.026）有关;P53突变与肿瘤数目（P=0.013）、包膜（P=0.046）、分化程度（P=0.013）、复发（P=0.003）有关;HBeAg阳性与P53突变有关（P=0.024）.HBeAg阳性及P53突变患者的术后复发时间较短（4.6±2.1）mo（P 0.001）.结论：HBeAg阳性和P53突变在肝癌的发生发展中起重要作用，常提示预后较差. 【关键词】肝炎e抗原,2型；基因,P53；癌,肝细胞；预后 【Abstract】AIM:TostudytherolesoftheserumHBeAgandtheP53mutationinthedevelopmentofhepatocellularcarcinoma(HCC).METHODS:ELISAHBeAgandPCRanddirectsequencingmethodutation.TheclinicopathologiccharacteristicsHBeAgpositive,and25cases(59.5%)hadP53mutation.Amongthem,16casesorcount（P=0.002）,degreeofthetumordifferentiation（P=0.025）andrecurrence（P=0.026）.P53mutationorcount（P=0.013）,capsule（P=0.046）,degreeofthetumordifferentiation（P=0.013）andrecurrence（P=0.003）.ThereHBeAgpositivityandP53mutation（P=0.024）.Therecurrencetimeutation［(4.56±2.13)months,P 0.001］.CONCLUTION:SerumHBeAgandP53mutationplayimportantrolesinthedevelopmentofHCC,andtheyimplyapoorprognosis. 【Keya,.freela,HCC)与乙型肝炎病毒(hepatitisBvirus,HBV)感染密切相关.慢性HBV感染者中HCC发生的高危性比非HBV感染人群高约200倍［1］.我国HCC主要发生在慢性HBV感染者，HBV感染可从无症状病毒携带发展为急性肝炎、慢性肝炎、重症肝炎、肝硬化、HCC，其临床结局与HBV在体内演变的情况和机体的免疫应答有关［1］，鉴定体内HBV的感染状况对揭示HCC的发病机制有积极意义.近来发现HBeAg与HCC的复发和预后相关.freelL离心后取血清1.5mL用eppendorf管于-80℃冰箱保存. 1.2方法 取-80℃冰箱保存的癌组织标本约0.03g，匀浆成细胞悬液，然后按照TIANampGenomicDNAKit（北京天根公司提供）的说明书提取DNA.样品储存于-20℃.HBeAg检测采用ELISA方法，由厦门新创公司提供试剂盒，按说明书操作及判断结果.设计引物检测P53基因第7外显子249位点.上游引物为：5′TCCTAGGTTGGCTCTGAC3′，下游引物为：5′CAAGTGGCTCCTGACCTG3′，全长131bp.由上海生工协助合成.按照MasterMix(北京天根公司提供)说明书行PCR反应.反应条件为：94℃5min；94℃45s，55℃30s，72℃45s,35个循环；72℃5min.产物送上海生工协助完成纯化和测序，测序引物同PCR引物. 统计学处理：用SPSS13.0统计软件包进行处理.对计量资料用t检验，对计数资料用χ2检验（或确切概率法）分析，用LogRank检验进行复发时间分析. 2结果 2.1HBeAg与P53基因的表达情况HBeAg阳性者20例（47.6%）;P53突变25例（59.5%，图1：G T突变）；HBeAg阳性同时伴有P53突变者16例.HBeAg的表达与肿瘤数目（P=0.002）、分化程度（P=0.025）、复发（P=0.026）有关；P53突变与肿瘤数目（P=0.013）、包膜（完整/不完整或无）（P=0.046）、分化程度（P=0.013）、复发（P=0.003）亦有关（