HBV持续感染患者调节性T细胞检测及其意义论文.docVIP

　　HBV持续感染患者调节性T细胞检测及其意义论文 赵爽 孙均 周培培 徐娟 颜学兵 【摘要】 目的研究调节性T细胞(Treg)在慢性乙型肝炎(CHB)发病机制中的作用，为寻找治疗CHB的新方法奠定基础。方法用流式细胞仪检测了75例CHB患者和30例慢性乙型肝炎病毒(HBV)携带者外周血中Treg含量，CHB患者中HBeAg阳性患者39例，HBeAg阴性患者36例，慢性HBV携带者中HBeAg阴性和HBeAg阳性患者各15例。并对其中23例CHB患者服用核苷(酸)类似物前后外周血Treg含量进行检测。结果CHB患者外周血Treg含量明显高于慢性HBV携带者(P 0.05)，而CHB和慢性HBV携带者中HBeAg阴性和HBeAg阳性患者外周血Treg含量均无明显差异(P 0.05)。经核苷(酸)类似物治疗12周后，CHB患者外周血Treg含量较治疗前有所降低(P 0.05)。结论Treg在HBV致病机制中起一定的作用，体外调控Treg含量和功能可能为治疗HBV感染提供一个新的途径。 【关键词】 慢性乙型肝炎;慢性HBV携带者;调节性T细胞 Abstract: ObjectiveTo investigate the role of T regulatory cell (Treg) in the pathogenesis of chronic hepatitis B (CHB) and lay the basis for neination of Treg levels in the peripheral blood by floetry, of there ined before and after administration of nucleos(t)ide analogues in 23 CHB patients. ResultsThe Treg levels in the peripheral blood in CHB patients portant role in the pathogenesis of CHB. External regulation of the level and function of Treg might provide a neeans for the therapy of HBV infections. Key RNA的表达水平来判定CD4+CD25+Treg的含量。Foxp3虽被认为是Treg的特异性标志，但其属于胞内蛋白，检测时需细胞破膜处理，可能会影响检测的结果和下游的实验，故检测结果并不稳定。我们的实验用流式细胞仪检测Treg表面双标志物CD4+/CD25+的方法，研究慢性乙型肝炎(chroinc hepatitis B，CHB)患者和慢性HBV携带者外周血Treg含量的差异以及核苷(酸)类似物治疗前后Treg含量的差异，以研究Treg在HBV致病机制中的作用，为临床治疗CHB提供理论依据。 1资料和方法 1.1研究对象和分组75例CHB患者和30例慢性HBV携带者来自2006年12月—2008年6月徐州医学院附属医院感染性疾病科住院和门诊患者，其中男性65例，女性40例，年龄18～60岁，平均年龄(41.8±4.6)岁。正常对照组(NC)20例来自徐州医学院附属医院健康体检中心，既往身体健康，无其他基础病，其中男性11例，女性9例，平均年龄(40±4.2)岁。CHB组中HBeAg阳性患者39例，HBeAg阴性患者36例，慢性HBV携带者中HBeAg阴性和HBeAg阳性患者各15例。CHB患者中有27例服用核苷(酸)类似物治疗(其中4例患者在治疗12周前失访，10例服用恩替卡韦，13例服用阿德福韦酯)。CHB诊断依据2000年西安全国病毒性肝炎会议制定的诊断标准，排除甲型肝炎、丙型肝炎、戊型肝炎、药物性和酒精性肝病、自身免疫性肝病等。 1.2标本的收集与处理所有患者采外周血1 ml用EDTA抗凝，直接用流式细胞仪检测CD4、CD25。 1.3流式细胞仪检测CD4、CD25抗体购于杭州联科公司。将相应抗体分别加入2只空白离心管中，分别为阳性管和阴性管，每管分别加入抗凝外周血100 μl，充分混匀，4 ℃避光20 min。在全血样本中加入溶血剂1 ml，混匀放置10 min,全血样本PBS洗涤3次，培养管洗1 次，沉淀用200 μl PBS 悬浮，上流式细胞仪检测。 1.4统计学处理SPSS 11.0统计软件对数据进行分析，计量资料两组间比较采用t检验。P 0.05认为差异有统计学意义。 2结果 2.1CHB患者和慢性HBV携带者外周血Treg含量比较CHB组外周血Treg含量明显高于慢性HBV携带者(P 0.05)，见表1。 表1CHB患者