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　　HCV感染者IgG/IgM论文 【关键词】 免疫紊乱 摘要:目的 初步探讨IgG/IgMTCIC在HCV感染者体内的意义。 方法 采用捕捉法ELISA，以抗人IgG的羊IgG为包被抗体，HRP抗人IgM的羊IgG 为指示抗体，检测80例HCV感染者及30例健康人体内IgG/IgMTCIC的水平。结果 HCV感染组IgG/IgMTCIC的水平显著高于健康对照组（P 0.01）；进一步比较与ALT及BT的关系，发现IgG/IgMTCIC与两者均无明显关系（P 0.05）。结论 IgG/IgMTCIC并不直接参与肝脏损伤的病理过程，而可能是丙肝患者体液免疫紊乱的重要指征。 关键词:HCV；IgG/IgMTCIC；ELISA；免疫紊乱 Abstract: Objective To preliminarily elucidate the significance of IgG/IgMTCIC in HCVinfected individuals. Methods Coated ed to human IgG，and then detected by HRPlabeled goat IgG aimed to human IgM，a capture ELISA method ine the circulating immune plexes posed of IgG and IgM (i.e. IgG/IgMTCIC) in HCVinfected individuals (80 cases) and healthy individuals (30 cases). Results The level of IgG/IgMTCIC in HCVinfected individuals of HCV infected individuals. Conclusion It age of liver,ight be an important indication that reflected the disordered status of humoral immune response. Key munologic derangement 自双特异性循环免疫复合物(tined circulating immune plexes,TCIC)的概念提出以来［］.freela)。 1.2 研究对象 HCV RNA阳性血清标本80例（其中男性37例，女性43例），采自广州市传染病医院；另取30份健康体检者血清标本作为对照组。 1.3 检测方法 1.3.1 检测IgG IgM双特异性免疫复合物捕捉法ELISA的操作过程 用0.1 mol/L，pH9.6的碳酸缓冲液将抗人IgG的羊IgG稀释至7.5 μg/mL，加入反应板，每孔0.1 mL，4 ℃18-24 h，用0.01 mol/L,pH 7.4 PBST洗涤3次，加入用生理盐水按1∶75稀释的血清标本，每孔0.1 mL，4 ℃18-24 h，同上洗涤；用含25%兔血清的PBST将HRP抗人IgM的羊IgG作1∶3 200稀释，每孔0.1 mL，37 ℃ 1 h，同上洗涤；加入TMBH2O2底物溶液，每孔0.1 mL，37 ℃避光反应45 min； 2 mol/L的H2SO4终止反应，最后在BIORAD 680全自动酶标仪 (美国产品)上测OD值。每块反应板分别以混合人血清和羊血清作阳阴性对照。 1.3.2 ALT测定方法 按试剂盒说明进行。 1.3.3 黄疸指数（BT）测定方法 按卫生部颁发的临床操作规程进行。 2 结果与分析 2.1 本ELISA法的特异性 2.1.1 阻断实验 随机取血清标本20份，同时设阻断组和对照组。 在加入HRP抗人IgM的羊IgG前，阻断组先加入用PBST按100 μg/mL稀释的抗人 IgM的羊IgG，对照组加入PBST，37 ℃ 1 h，其余操作步骤同前，最后按同份血清阻断孔与对照孔的测定结果来计算其阻断率。结果20 份标本的阻断率均大于50%。 2.1.2 替代实验 取猪、兔、鸭和牛血清代替人血清标本进行实验。 结果所有标本与作阴性质控的羊血清无异，其OD值均稳定在0.00～0.05之间。 2.2 ELISA的重复性 结果表明，本ELISA法的变异系数均小于10%。 2.3 HCV感染者IgG/IgMTCIC的检测 HCV RNA阳性血清IgG/IgMTCIC的±s为092±0.11，而健康人血清为0.65±0.08，前者显著高于后者（P 0.01）。 2.4 HCV感染者IgG/IgMTCIC与ALT的关系 在80例HCV感染者中，ALT正常者21例，升高者59例。经