HPLC法分析阿奇霉素及各类注射剂中有关物质的含量论文.docVIP

　　HPLC法分析阿奇霉素及各类注射剂中有关物质的含量论文 王明娟 许明哲 胡昌勤* 王立新 王晨 【摘要】 目的 建立一种能用于阿奇霉素原料及制剂中有关物质控制的HPLC方法。方法 采用XBridge Shield RP18柱(250mm×4.6mm，5μm)，柱温30℃，流动相为乙腈∶pH8.2磷酸盐缓冲液(0.05mol/L磷酸氢二钾溶液，用20%磷酸调节pH至8.2)(55∶45)，流速1.0ml/min；检测波长210nm；样品溶液的进样量为200μg。结果 阿奇霉素与其杂质(氮杂红霉素A，红霉素A肟，N去甲基阿奇霉素.freelethod for determination the related substances of azithromycin in parenteral products. Method The separation ed on a column of XBridge Shield RP18 (250mm×4.6mm, 5μm), ol/L K2HPO4 solution, adjust pH to 8.2 obile phase at flol/min. The detection . The injection amounts of sample solutions ycin and its related substances, including azaerythromycin A, erythromycin A oxime, Ndemethylazithromycin, desosaminylazithromycin and azithromycin Noxide, can be each other on the developed system. The coexistence acids in azithromycin for injection e.g. HCl, H2SO4, lactobionic acid, maleic acid, citric acid,.freelination of the related substances. Linearity, accuracy, sensitivity and robustness of the method could meet the specific analytical requirements. Conclusion Thedeveloped method can be successfully applied to the quality control of azithromycin drug substances and products. KEY 20A型PDA检测器；S C18，50mm×4.6mm，2.5μm；柱温30℃；乙腈∶pH8.2磷酸盐缓冲液(0.05mol/L磷酸氢二钾溶液，用20%磷酸调节pH至8.2)(55∶45)；流速1.0ml/min；检测波长210nm；进样量为20μl(大输液中由于阿奇霉素浓度很低，最高为2mg/ml，故通过加大进样体积使总的进样量为200μg)。 2 结果 2.1 HPLC方法的确定 以阿奇霉素和5种阿奇霉素杂质的分离情况为指标，调整流动相使得阿奇霉素与诸杂质能达到较好的分离，且保持较好的峰形(图2)。 本色谱系统对色谱柱有一定的选择性。阿奇霉素及其杂质在杂化颗粒的C18柱(XBridgeTM Shield RP18和XTerra MS C18)和聚合物包被的C18柱(CAPCELL PAK C18 UG120)中峰形较好， 但在普通耐碱色谱柱阿奇霉素及其杂质混合图谱(Apollo C18)中峰形不理想，且内嵌极性基团的XBridge Shield RP18柱的选择性与其它C18柱不同，内嵌极性基团的存在有利于难分离物质对N去甲基阿奇霉素与阿奇霉素德糖胺的分离，建议采用硅胶表面经杂化处理的十八烷基键合硅胶色谱柱，如XBridge Shield RP18(250mm×4.6mm，5μm)或与之相当的色谱柱，系统适用性指标采用：①调节流动相比例，使阿奇霉素峰的保留时间约为11min，此时阿奇霉素N氧化物、N去甲基阿奇霉素、阿奇霉素德糖胺、氮杂红霉素A和红霉素A肟相对于阿奇霉素的保留时间分别为0.35、0.48、0.52、0.58和0.62，上述杂质相对于阿奇霉素的校正因子分别为0.62、0.70、1.66、0.77和2.94；②阿奇霉素峰的拖尾因子不得大于2.5；③阿奇霉素对照品溶液在100℃加热30min后，阿奇霉素与其相邻降解杂质峰的分离度应符合规定(图3B)。 2.2 方法学考察 按中国药典2005版附录XIXA［6］的