HPLC法测定痔炎消片中绿原酸和芦丁的含量论文.docVIP

　　HPLC法测定痔炎消片中绿原酸和芦丁的含量论文 【摘要】 目的 建立高效液相色谱法同时测定痔炎消片中绿原酸和芦丁的含量。方法 采用Diamonsil C18柱（4.6mm×250mm,5μm）,流动相：乙腈-0.5%磷酸（20：80），流速：1.0ml/min,检测波长：344nm。结果 绿原酸在进样量0.0192～0.48μg呈良好的线性关系；平均加样回收率为99.89% ，RSD=0.33%（n=5） 。芦丁在进样量为0.096～2.406μg呈良好的线性关系；平均加样回收率为99.73% ，RSD=1.49%（n=5） 。结论 本法操作简便，重现性好，可用作该药品的质量控制。 【关键词】 痔炎消片 绿原酸 芦丁 HPLC 含量测定 【Abstract】 Objective To establish a HPLC method for the determination of chlorogenic acid, rutin in Zhiyanxiao tablets.Methods A Diamonsil C18 column（250mm×4.6 mm,5μm）obile phase of acetonitrile-0.5%phosphoric acid solution（20:80）.The flol/min and the detection .Results The linerarity range of chlorogenic acid and rutin ethod is simple,accurate and can be used for the standard quality control of Zhiyanxiao tablets. 【Key ination 痔炎消片是由火麻仁、紫珠叶、槐花、金银花、地榆、白芍、三七、茅根、茵陈、枳壳十味药材经适当加工制成，具有清热解毒，润肠痛便.freelonsil C18柱（4.6mm×250mm,.freel）,流动相：乙腈-0.5%磷酸（20：80），流速：1.0ml/min,检测波长：344nm，进样量：20μl,柱温：室温。在此色谱条件下，对照品和样品色谱图见图1～4。 2.2 对照品溶液的制备 2.2.1 绿原酸对照品的制备 精密称取绿原酸对照品4.8mg,置20ml棕色瓶中，加甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取5ml，置50ml棕色瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml中含绿原酸0.024mg）。 2.2.2 芦丁对照品的制备 精密称取芦丁对照品12.03mg，置20ml量瓶中，加甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取10ml，置50ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml中含芦丁0.1203mg）。 2.2.3 混合对照品溶液的制备 精密量取绿原酸对照品和芦顶对照品各5ml，置同一棕色瓶中，摇匀，即得。 2.3 供试品溶液的制备 取本品5袋内容物，混匀，研细，取0.5g，精密称定，置50ml棕色容量瓶中，加甲醇-水（3：7）的溶液40ml，超声30min使溶解，放冷，加至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。 2.4 空白样品的制备 据处方比例，按标准制备法［1］制备不含金银花、茵陈和槐花的痔炎消颗粒，并按“2.3”项下方法同法制成阴性空白对照溶液。 2.5 线性关系的考察 分别精密量取对照品溶液1.0、2.0、5.0、10.0、15.0、25.0ml,分别置25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，进样测定。以峰面积积分值为纵坐标，进样量（μg）为横坐标绘制标准曲线，回归方程分别为： 绿原酸：y=308248.9x+402.2,r=0.9999，线性范围为：0.0192～0.48μg; 芦丁：y=461350.8x-4078.5,r=0.9998，线性范围为： 0.096～2.406μg。 2.6 精密度试验 对同一份供试品溶液，连续进样6次，结果绿原酸、芦丁峰面积的RSD（n=6）分别为1.81%、2.76%，表明精密度较好。 2.7 稳定性试验 取供试品溶液，在室温下放置0h、2h、4h、6h、8h、12h分别进样，测定峰面积，结果绿原酸、芦丁峰面积的RSD（n=6）分别为2.35%、3.37%。 2.8 重复性试验 取同一批次（061001）样品5份，同法测定，结果绿原酸的平均含量为2.06mg/g，RSD为0.70%；芦丁的平均含量为1.06mg/g，RSD=0.81%，表明该法重复性好。 2.9 加样回收试验 精密称取已知含量的样品6份，分别精密加入绿原酸、芦丁对照品适量，按“2.3”项下方法配制供试品溶液，依上述方法测定，计算回收率，结果见表1、表2。 表1 样品中