MMP2、PTEN在骨肉瘤组织中的表达及临床意义论文.docVIP

　　MMP2、PTEN在骨肉瘤组织中的表达及临床意义论文 【摘要】 目的 探讨基质金属蛋白酶2 (MMP2)及张力蛋白和辅助蛋白同源、第10号染色体丢失的磷酸酶(PTEN)的表达在骨肉瘤发生、发展中的作用及其相互关系。方法 应用免疫组化SP法检测40例骨肉瘤组织、20例骨软骨瘤组织中MMP2、PTEN蛋白的表达情况，并分析两者之间表达的相关性。结果 MMP2在骨肉瘤组织中的阳性率为65%（26/40），而在骨软骨瘤组织中的阳性率为0，差异具有显著性（χ2=7.253，P 0.01）。PTEN蛋白在骨肉瘤组织中的阳性表达率为55%（22/40），而在骨软骨瘤组织中为90%（18/20），两者相比差异有统计学意义（χ2=4.164，P 0.05）。在骨肉瘤组织中.freel厚连续切片。 1.2 检测方法 采用免疫组化SP法。鼠抗人MMP2单克隆抗体和鼠抗人PTEN单克隆抗体以及SP试剂盒均购自北京中杉金桥生物技术公司。实验步骤严格按试剂盒说明书进行。石蜡切片脱蜡至水，体积分数0.03的过氧化氢室温孵育10 min，以微波枸橼酸盐进行抗原修复，正常羊血清封闭20 min，DAB显色，苏木精复染，脱水，透明，封片，中性树胶封固。用已知阳性切片作为阳性对照，用PBS代替一抗作为阴性对照。 1.3 结果判定 参照FROMOMP2、PTEN在骨肉瘤、骨软骨瘤组织中的表达 MMP2阳性染色主要定位于肿瘤细胞的胞浆或胞膜上，为棕黄色颗粒。PTEN阳性染色主要定位于肿瘤细胞胞浆，亦为棕黄色颗粒。MMP2在骨肉瘤组织中的表达率为65%（26/40），显著高于其在骨软骨瘤组织中的表达率（0），差异有显著意义（χ2=7.253，P 0.01）。PTEN在骨肉瘤组织中的表达率为55%（22/40），显著低于其在骨软骨瘤组织中90%（18/20）的表达率，差异具有显著性（χ2=4.164，P 0.05）。 2.2 MMP2、PTEN在骨肉瘤组织中的表达与临床病理特征的关系 MMP2、PTEN在不同性别、年龄及病理类型的骨肉瘤组织中的表达差异无显著性（P 0.05）。MMP2在各Enneking外科分期骨肉瘤组织中的阳性表达差异有显著性（χ2=6.538，P 0.05），随着Enneking外科分期的增高，MMP2阳性表达强度也呈增强趋势。PTEN阳性表达率与骨肉瘤的肺转移相关（χ2=3.961，P 0.05）。见表1。 2.3 MMP2、PTEN在骨肉瘤组织中表达相关性 MMP2与PTEN在骨肉瘤组织中的表达呈显著负相关（r=-0.403，P 0.01）。见表2。表1 MMP2、PTEN在骨肉瘤组织中的表达与临床病理特征的关系例表2 MMP2、PTEN在骨肉瘤组织中表达的相关性（例）PTENnMMP2+～-+～22814-18180 3 讨 论 恶性肿瘤的侵袭和转移是一个多环节、多步骤的复杂过程，在肿瘤浸润转移过程中，肿瘤细胞穿越ECM和基底膜这些自然屏障时，必须依赖于能降解ECM和基底膜成分的分泌1。MMPs是肿瘤细胞分泌的主要基质降解酶之一，它能降解所有ECM成分，其中MMP2在肿瘤介导的ECM降解中起关键作用2。MMP2能降解Ⅳ型胶原，促进肿瘤血管形成和影响细胞间黏附作用。华成舸等3研究显示，骨和软组织恶性肿瘤与良性肿瘤中的MMP2表达率有显著性差异。MMP2能切断基底膜的支架即Ⅳ型胶原，破坏小血管、淋巴管的基底膜，从而引起血行和淋巴转移。同时，MMP2降解肿瘤细胞ECM，亦造成骨肉瘤的局部浸润。MIYAKE等4研究显示，表达MMP2的肿瘤细胞株穿越基底膜的数量远远大于对照组，表明MMP2降解基底膜能力与细胞浸润转移能力密切相关。多项研究表明，MMP2的表达与肿瘤的转移及侵袭程度密切相关，是肿瘤恶性进展的标志5。SIER等6研究结果显示，MMP2的表达与肿瘤的转移及较差的预后密切相关。本研究显示，40例骨肉瘤标本中，MMP2阳性率为65%，而骨软骨瘤中MMP2的阳性率为0，差异具有显著性。MMP2在骨肉瘤Enneking外科分期各期中的阳性表达率有显著性差异。随着Enneking外科分期的增高，MMP2的阳性表达程度也增高，说明MMP2表达的增强有可能促进了骨肉瘤的浸润转移。 PTEN基因位于人类10q23，是近年来发现的具有双重特异性磷酸酶活性的抑癌基因，能使磷酸化的酪氨酸、丝氨酸、苏氨酸去磷酸化，通过去磷酸化作用而发挥抑癌功能。PTEN基因编码的蛋白具有磷酸酯酶的特征和作用，可负向调节PI3K/Akt信号通路，对抗PI3K途径转导的生长和生存信号，抑制肿瘤的发生和发展。肿瘤组织中PTEN基因突变导致其磷酸酶活性剧降，肿瘤细胞恶性增殖