MMP9、CD44v6在皮肤鳞状细胞癌和基底细胞癌中表达的对比研究论文.docVIP

　　MMP9、CD44v6在皮肤鳞状细胞癌和基底细胞癌中表达的对比研究论文 王琦 刁路明 孙凯 付文荣 田英 【摘要】 目的：探讨基质金属蛋白酶MMP9、细胞粘附因子CD44v6在皮肤鳞状细胞癌（Squamous cell carcinoma,SCC）和基底细胞癌（Basal cell carcinoma,BCC）中表达的意义及相关性。方法：采用免疫组织化学法对82例石蜡包埋组织标本进行检测和统计分析。结果：①MMP9在皮肤SCC中阳性率（88.1%）显著高于皮肤BCC组（48%）和正常皮肤组（13.3%），CD44v6在正常皮肤中的阳性率（100%）显著高于皮肤SCC组（66.7%）和皮肤BCC组（20%）；②MMP9的高表达率与皮肤SCＣ的分化程度呈负相关，CD44v6的高表达率与皮肤SCC的分化程度呈正相关；③MMP9和CD44v6在皮肤SCC和BCC中表达无明显相关。结论：CD44v6和MMP9与皮肤BCC和SCC的发生、分化密切相关，可作为研究和判断皮肤SCC和BCC生物学行为和预后独立的重要指标。 【关键词】 鳞状细胞癌； 基底细胞癌； MMP9； CD44v6； 免疫组织化学 MMP9是蛋白水解酶中较为重要的一类，参与细胞外基质和细胞膜的降解，促进肿瘤侵袭和转移［1］。CD44是一类分布广泛的跨膜糖蛋白，参与机体各种生理功能，其外显子按表达和拼接方式的不同分为CD44s和CD44v［2］.freelpus光学照相显微镜；德国Leica组织切片机；YMP9(浓度1:100)和CD44v6 (浓度1:300)工作液50μl，4℃冰箱中过夜；(7)第二天将过夜切片用PBS冲洗3×5′；(8)沥干PBS液，每张切片加50μl生物素标记的第二抗体(试剂C)，室温孵育20min；(9)PBS冲洗3次，每次3min；(10) 沥干 PBS液，每张切片加50μl链霉菌抗生物素-过氧化物酶溶液(试剂D)，室温下孵育20min。PBS冲洗3次，每次3min；(11)沥干PBS液，每张切片加100μl的新鲜配置的酶底物显色液（DAB）进行显色5min；(12)自来水冲洗，苏木素复染，用中性树胶进行封片； (13)用PBS代替一抗作空白对照。 1.3 免疫组化结果判定 CD44v6蛋白阳性表达为细胞膜上有棕黄色颗粒样物质沉着。MMP9蛋白阳性表达为细胞浆内有棕黄色颗粒样物质沉着。结果判定采用半定量积分法，免疫组化染色记分标准如表1，以染色强度与阳性细胞的百分比的乘积做为半定量标准。MMP9以0～3分为阴性（-），4～6分为弱阳性（+），7～9分为阳性（++），10～12分为强阳性（+++）［3］；CD44v6以0分为阴性（-），1分为弱阳性（+），2～3分为阳性（++），大于3分为强阳性（+++）［4］。阳性和强阳性统称为高表达。表1 免疫组化染色记分标准 1.4 统计学处理 应用SPSS10.0软件分析系统，采用χ2检验和精确概率法及计数资料的相关性分析，以P 0.05时认为有统计学意义。 2 结果 2.1 MMP9、CD44v6在正常皮肤、皮肤SCC和皮肤BCC中的表达 MMP9阳性定位于癌细胞胞浆中，从正常皮肤到BCC，直到SCC，MPP9表达逐渐增强，各组间阳性表达率比较有统计学意义（P 0.05）。CD44v6的阳性表达定位于癌细胞胞膜上，从正常皮肤到SCC，直到ＢCC，CD44v6表达逐渐下降，各组间阳性表达率比较有统计学意义（P 0.05），见表2,3。表2 MMP9在正常皮肤、皮肤SCC及BCC中的表达注：与SCC组比较，χ2=12.824, △P 0.01；与正常皮肤组比较，χ2=28.590, # P 0.01; 与正常皮肤组比较，χ2=4.952, * P 0.05。表3 CD44v6在正常皮肤、皮肤SCC及BCC中的表达注：与SCC组比较，χ2=4.956, △P 0.05；与BCC组比较，χ2=24.000, # P 0.01; 与BCC组比较，χ2=13.666, * P 0.01。 2.2 MMP9和CD44v6与皮肤SCC的分化程度关系 MMP9在皮肤SCC高、中、低分化组中高表达率分别为33.3%、61.5%、92.8%,MMP9的高表达与皮肤SCC分化程度呈负相关（χ2=10.881,P 0.01）。 CD44v6在皮肤SCC高、中、低分化组中高表达率分别为60.0%、23.1%、7.1%,CD44v6的高表达与皮肤SCC分化程度呈正相关（χ2=13.940,.freelas等曾对皮肤肿瘤中MMP9进行研究，发现鳞状细胞癌中MMP9表达高于基底细胞癌［5］，这与本研究相符。我们观察到MMP9表达与皮肤肿瘤的病理类型及分化程度密切相关，随着恶性程度增高、分化降低、侵袭力增强，M