免疫球蛋白分子断片Fab.docVIP

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2017-06-14 发布于北京
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免疫球蛋白分子断片Fab.doc

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5?免疫球蛋白分子断片Fab 　　1958年波特氏首先用木瓜酶（papain）将IgG分子断裂为3个大小相似的断片，其中能与抗原结合的2个断片叫做Fab，每一Fab断片的分子量为45,000。Fab段是由木瓜蛋白酶彻底消化IgG分子去除Fc段和铰链区后留下来的独臂片段，是一价的，只有一个抗原结合部位，分子量在50KD左右，由于缺少Fc段，它不能沉淀抗原，也不能被活体的免疫细胞所识别；但拥有小分子量和交叉反应小的优点，因此常用于放免中的功能研究，也用于阻断细胞、组织内源性的免疫球蛋白及在多重免疫标记中，一抗来源于同一种属时，阻断已经暴露的IgG抗原决定簇。一、目的要求1.复习巩固免疫化学的基本知识2.熟练掌握免疫扩散法的操作步骤3.掌握其在抗血清效价的测定和特异性抗体的分析中的应用二实验原理琼脂糖的疏散网状结构有利于大分子的自由迁移合适比例的抗原抗体结合后聚集形成沉淀；沉淀的产生阻止抗原抗体复合物的自由运动；沉淀带形成一种特异性的半渗透性屏障，阻滞相同抗原抗体复合物，而允许不同的分子通过。沉淀线的特征与位置：1 抗原、抗体的特异性和浓度，2 抗原、抗体分子的大小3 扩散率当抗原体存在多种成分时，将呈现多条沉淀线以至交叉反应线，因此可用来检查抗原和免疫血清的特异性、纯度或浓度比较抗原之间的异同点，因而应用范围较广。 ?