同种异体神经移植处置入bFGF复合降解膜的实验研究论文.docVIP

　　同种异体神经移植处置入bFGF复合降解膜的实验研究论文 吴锦生，辛畅泰，杨晓霞，徐媛，魏侃，安贵林，曹阳 【关键词】 神经移植 摘 要 目的 探讨在异体神经移植处置入bFGF(basic fibroblast gro后，移植经冷冻处理的同种异体坐骨神经移植物。A组神经移植物经bFGF处理并在移植处置入bFGF复合降解膜，B组移植物不经bFGF处理，移植处置入不含bFGF的降解膜，C组移植物不经bFGF处理，移植处不置入降解膜。术后90、180 d行电生理、组织学、血―神经屏障等各项指标观测。结果 A组再生有髓神经纤维的数量和直径明显较B、C组的多而粗(P 0.05)，结缔组织增生较少，血―神经屏障恢复和电生理指标均优于B、C组。结论 bFGF复合降解膜有提高同种异体神经移植再生的作用。 关键词 神经移植；同种异体移植物；bFGF；神经再生 Research on the effect of bFGF pound degradation membrane to allograft of nerves Abstract: Objective To promote regeneration effect by placing bFGF plex degradation membrane oting nerve regeneration and inhibiting connective tissue proliferation in transplantation site of xenogeneic nerve. Methods 60 rats are divided into group A, B and C. All rats 2 cm of sciatic nerve cutted off in left lob. The nerve segment ent embrane after transplanted. Group B: nerve segment embrane not containing bFGF. Group C: nerve segment ount and diameter of sheathed nerve fiber outnumbered that in group B and C(P 0.05). The connective tissue proliferation ight promote nerve regeneration by interfering connective tissue proliferation ote regeneration of allograft of nerve. Keyg/kg腹腔麻醉，左大腿术区剃毛、消毒，显露坐骨神经，切除2 cm神经段，切除的神经段经20%甘油盐水浸泡15 min后，-80 ℃冷存10 d，作为移植供体。将供体神经段在移植前复温，移植到神经缺损处。A组供体神经段先经含bFGF和降低维生素C浓度试剂的生理盐水浸泡15 min，再移植，并在缝合处包裹bFGF复合降解膜；B组和C组供体神经段移植前用生理盐水浸泡15 min，B组在缝合处包裹不含bFGF的降解膜；C组不包裹降解膜。 1.3 观察指标 1.3.1 镜下观察 取术后90 d和180 d的移植部位神经，分成近段（正常神经部位）、移植段、远段（神经再生部位）和神经远、近端缝合段等五个部分，制成不同标本。①锇酸髓鞘染色切片观察及显微图像分析测定A、B和C组有髓神经纤维的形态结构、数量和直径等差异；②透射电镜观察再生神经超微结构的变化；③连续切片Mallory和H.E染色观察各组一般组织结构尤其是结缔组织增生程度的差异。 1.3.2 血―神经屏障HRP示踪 按照Olssony的方法1，在神经移植段远侧部位的神经外周注入30%HRP（sigmaⅡ型）溶液后1 h，切取标本，制成20 μm厚的切片，HRP分布处呈棕黄色反应。观察各组血―神经屏障功能恢复的差异。 1.3.3 神经近端缝合段周粘连测定 按汤绵波等2的方法，测定术后90 d各组神经近端缝合段与其外周组织粘连程度的差异。 1.3.4 电生理指标测试 测定术后180 d各组腓肠肌，显示潜伏期和波幅的变化，了解其神经传导速度和有效神经纤维数，从而对比神经再生效果。 观测数据经t检验和方差分析。 2 结果 2.1 镜下观察 髓鞘染色可见有髓神经纤维的髓鞘呈黑色。术后180 d，A组移植段和远段纤维的数量明显较B、C两组多而粗，髓鞘着色也较深（图1a、b、c），A组神经远、近两段的有髓纤维数量相似，直径差异明显。B、C组的神经远段有髓纤维数量明显较其近段的少。B、C组移植段和远段的近中央部位多出现变性、坏