地表水中浮游植物叶绿素a的测定.pdfVIP

第 23卷 第 2期 污 染 防 治 技 术 Vo1．23，No．2 2010年 4月 P0LLUT10N C0NTR0LTECHN0L0GY Apr．，20 10 地表水中浮游植物叶绿素 a的测定 张宗祥 。 朱宇芳 (泰州市环境监测 中心站 ，江苏 泰州 225300) 摘 要 ：比较 了研磨法和超声法测定浮游植物叶绿素 a结果表明，丙酮 一超声法对浮游植物叶绿素 a的萃取效率优于 研磨法 ，人为误差小、精密度较高、且简便安全。 关键词 ：浮游植物 ；叶绿素 a；提取 中图分类号 ：X832 文献标识码 ：A Determ inationofPhytOplanktOn Chlorophyll—ainSurfaceW ater ZHANG Zong-xiang． ZHU Yu—fang (Ta~houEnvironmentalMonitoringCenterStation，Tahou，Jiangsu225300，China) Abstract：Thecomparativestudyongrindingextractionandacetone—ultrasoundextraction inthedeterminationofChlorophyll — awasconducted．Itwasfoundthatcomparedtothestandardgrindingmethod，theacetone—ultrasoundmethodhadtheimprove- mentsofartificialerror，highprecision，operationalsimplicityand safety． Keywords：phytoplankton：chlorophyll—a；extraction 引 言 1．2 试 剂 叶绿素a是反映水体初级生产力 的重要指标 ， 90％丙酮、碳酸镁粉末。 也是湖泊富营养化评价的重要参数。测定叶绿素 1．3 实验方法 a的方法主要有高效液相色谱法…、荧光光度法 1．3．1 丙酮 一研磨法 采用 《水和废水监测分析 和分光光度法 等 ，其 中分光光度法因操作简便 方法》(第4版)方法进行处理和分光光度分析 。 而应用广泛 。萃取溶剂的选择和细胞破碎方法 ，是 1．3．2 丙酮 一超声法 准确量取 200mL混合均 影响分光光度法测定叶绿素 a的主要因素。目前 ， 匀水 样 ，以乙酸 纤维 滤膜 进 行 抽 滤 (负压 约 常用的萃取溶剂主要有丙酮、甲醇、乙醇和 DMF 50kPa)，水样抽完后，继续抽 1～2rain，尽量减少 (N，N一二 甲基甲酰胺)等，由于甲醇和 DMF具有 水分。抽滤完毕 ，滤膜于冰箱中低温干燥 6—8h， 较强的毒性 ，因此丙酮和 乙醇成 了 目前较常用 剪碎后放入具塞离心管中，加入少量碳酸镁粉末及 10mL之90％丙酮 ，超声破碎 10min，振荡器振摇 的萃取剂 ；主要的细胞破碎方法有研磨 、低温冻融、 超声破碎等。目前在环境监测中，叶绿素a的监测 (300r／min)萃取 1h，用离心机 (10000r／min)离 心 10min，将上清液转入 10mL容量瓶 中，用 90％ 方法 ，主要 依 据 《水 和废 水 监 测 分 析方 法》 (第4版) ，采用丙酮 一研磨法 。 丙酮定容至 10mL，摇匀待测。测定和结果其计算 同丙酮 一研磨法。 为了优化叶绿素 a的测定方法