大蓟总黄酮对荷瘤小鼠白细胞介素1和白细胞介素2的影响论文.docVIP

　　大蓟总黄酮对荷瘤小鼠白细胞介素1和白细胞介素2的影响论文 刘素君 周泽斌，胡霞，张杰 【摘要】 目的在分子水平上探讨大蓟总黄酮的抗肿瘤机制，主要研究大蓟总黄酮对荷瘤小鼠白介素1（IL1）和白介素2（IL2）的影响。方法通过RT-PCR方法半定量检测肿瘤小鼠细胞产生IL1 mRNA和IL2 mRNA的量来研究大蓟总黄酮能否促进肿瘤小鼠细胞产生IL1 mRNA和IL2 mRNA。结果大蓟总黄酮能够极为显著地提高肿瘤小鼠细胞产生IL1和IL2的转录水平（P 0.01）。结论 大蓟总黄酮能明显地促进肿瘤小鼠IL1和IL2 mRNA的表达。 【关键词】 大蓟总黄酮 白细胞介素 1 白细胞介素 2 Abstract:ObjectiveIn order to further exploit the anti-tumor mechanism of total flavones in Cirsium japonicum DC at molecular level, the effects of the total flavones on the interleukin 1（IL1） and interleukin 2（IL2） in the tumor-bearing mice RNA and IL-2mRNA detected in the spleen cells and abdominal cells of the tumor-bearing mice by highly sensitive RT-PCR technology. ResultsThe total flavones in Cirsium japonicum DC could enhance the expression of IL1 and IL2 mRNA（P 0.01）.ConclusionThis study suggested that the total flavones in Cirsium japonicum DC can enhance the expression of IL1 and IL2 mRNA. Key japonicum DC； IL1； IL2 大蓟为菊科管状花亚科菜蓟族蓟属植物Cirsium jiaponicum DC.的干燥地上部分或根［1］，我国各地均产。大蓟性凉，味甘、苦，归心、肝经，功效为凉血止血、祛淤止痛。大蓟的主要成分为黄酮类化合物.freelRNA的数量是其编码基因活性的直接反映。所以某种mRNA的定量是随着在不同的时空状态下编码基因表达活性的变化而有所不同。RTPCR具有很高的敏感性［5，6］，可以用来分析不同的组织、或相同组织不同发育阶段中mRNA表达状况的相关性。 1 器材与方法 1.1 供试动物 昆明种标准小鼠，体重（21±2）g，雌雄各半，由四川中药研究所提供BalB/C纯种小鼠，体重（20±2）g，雌雄各半，由成都中医药大学动物中心提供C57BL/6J纯种小鼠，体重（20±2）g，雌雄各半，由成都中医药大学动物中心提供。 1.2 大蓟总黄酮的制备 将大蓟70%乙醇提取物与硅藻土拌样挥干后,装入玻璃管柱中，用石油醚流洗,去除其中的叶绿素和极性较小的成分；流洗结束后倒出硅藻土化合物，挥干溶剂重新装入玻璃管柱，正丁醇流洗提取，用1%三氯化铝乙醇溶液与黄酮类化合物在滤纸上显色后，在紫外灯下观察有无黄绿色荧光的方法检测监控，提取至流洗液无黄酮反应时结束；将正丁醇提取液浓缩后挥干溶剂，用少量95%的乙醇溶解后上聚酰胺树脂柱，依次用水和95%的乙醇洗脱，收集95%的乙醇洗脱液；洗脱至检测无黄酮反应时结束；浓缩95%的乙醇洗脱液，自然干燥，挥干溶剂后得到的成分即为总黄酮成分。紫外分光光度测定其总黄酮含量为98.52%。 1.3 试剂RPMI 1640（GIBCO公司）；胎牛血清（HyClone公司）；小牛血清（HyClone公司）；Hepers（HyClone公司）；台肦蓝，MTT，LPS，SDS，ConA，琼脂糖均为Sigma公司；RPMI1640培养液；谷氨酰胺，青霉素，庆大霉素，Tris Base，a甲基甘露糖苷（amm）。 1.4 仪器 酶标仪（Bio-Rad，Model 3550）；离心机（北京医用离心机厂，LDZ52）；倒置显微镜（Nikon DEAPHOT Fx35DX）；二氧化碳细胞培养箱（BNA311，ESPEC）；电子恒温水浴锅（DK98I）；微量高速离心机（Jouan）；三恒电泳仪（ECP3000，北京市六一仪器厂）。 2 方法 2.1 造模方法昆明种小鼠，40只，体重18～22g，雌雄各半，随机分为空白组、