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大豆甙元对去卵巢大鼠雌二醇、维生素D和骨矿沉积的影响论文.doc
大豆甙元对去卵巢大鼠雌二醇、维生素D和骨矿沉积的影响论文
高美 金邦荃 张祎 汤丹 周耀民 詹巍
【摘要】 目的 研究不同剂量大豆甙元对去卵巢大鼠雌二醇(E2)激素水平和骨矿沉积的影响。方法 60只3月龄雌性大鼠分为6组:对照组、模型组、4个去卵巢+大豆甙元组,每日分别灌服10 mg/kg蒸馏水和25、50、75、100 mg/kg大豆甙元;9月龄时处死,分别测定骨灰分、Ca、P、Mg、Zn和血清中E225羟基维生素D(25OHD)及骨钙素(BGP)。结果 服用大豆甙元后,去卵巢大鼠血清E2水平未升高,但25OHD和BGP水平恢复正常,从而增加了骨Mg和Zn沉积。结论 大豆甙元通过调高(25OHD)及BGP水平,帮助骨矿沉积,可获得与雌激素替代疗法(ERT)近似的临床效果.freelinerals deposition in ovariectomized (OVX) rats.Methods 60 3monthold female rats al control, OVX and four different doses of daidzein (25, 50, 75, 100 mg/kg Bg, Zn in bone by atomic absorption method or Ca, P, E, 2,.freel by ELISA. Results The serum E2 level levels of 25OHD and BGP ent groups. Conclusions Daidzein could improve the bone minerals deposition through upregulating the levels of 25OHD and BGP, ilar to ERT but more safety because the level of E is not increased.
【Key inerals deposition; Daidzein; Ovariectomized rats
随着年龄增长及更年期的到来,女性卵巢功能逐渐衰退,卵泡退化导致雌激素(E2)水平陡然下降,内源性E2的匮乏,使中老年女性骨代谢平衡遭到破坏,骨吸收大于骨形成,特别是承重骨出现进行性骨量丢失、骨质疏松,甚至骨折。雌激素替代疗法(ERT)治疗更年期骨质疏松已经得到充分的肯定,但其也具有潜在的副作用〔1~3〕。作为植物雌激素的大豆甙元结构与E2相似,为7,4二羟基异黄酮,是含有芳香环的多酚非类固醇化合物,其能与内源性E2受体结合,主要与E2受体的β亚型结合,发挥E2样作用〔4,5〕。本实验以成年SD雌性大鼠为研究对象,建立骨质疏松模型,观测去卵巢大鼠服用大豆甙元后,体内E2、25OHD、骨钙素(Bone γglitamic acid containing protein,BGP)的变化对骨矿沉积的影响,尤其对Ca、P沉积的影响。
1 材料与方法
1.1 动物分组与饲养
60只3月龄SD雌性大鼠,体重为240~310 g,(由中国科学院上海动物中心提供),分为6组,为对照组、模型组、大豆甙元低剂量组、中剂量组、高剂量组、极高剂量组,每组10只,分别灌服25、50、75和100 mg/kg体重大豆甙元。参照国家大鼠配合饲料标准,设计无大豆颗粒饲料,以避免饲料中大豆成分对实验结果的干扰,其他营养成分满足成年鼠生理需要〔6〕。术后大鼠于SPF实验室饲养,室温20~25℃,相对湿度70%~75%,自由饮水和摄食。饲养至大鼠9月龄时,宰杀取样,制备待测。
1.2 去卵巢大鼠模型的构建
50只3月龄清洁级SD大鼠于无菌条件下行背部双侧卵巢切除术,建立去卵巢大鼠模型,模拟绝经后骨质疏松〔7〕。用0.8 g/L戊巴比妥钠腹腔注射麻醉后,腹位固定在手术台上,剪去腰部的被毛,用碘伏消毒。由距最后一根肋骨1 cm的尾侧开始,在背部正中切开皮肤约1 cm,从切口处向左右两侧钝性分离背皮。在腹侧壁肌上确定卵巢部位,做一切口,完整切除卵巢,彻底止血后分层缝合腹膜、肌肉和皮肤。另外10只对照组大鼠不切除卵巢,只切除少许脂肪。术后青霉素抗感染3 d,自由饮水、摄食,5 d后进入正式实验。
1.3 实验药品
白色粉末结晶的大豆甙元,纯度98%,蒸馏水配制成灌服液,于每日清晨灌服一次;每周分别称量个体体重,以调整灌服剂量。
1.4 组织样品预处理
9月龄时,所有大鼠空腹称重,直接股动脉放血处死。收集血液,分离血清,4 000 r/min,离心10 min,保存于-20℃冰箱待测;分离左侧股骨,剔除骨表面软组织,生理盐水浸泡的湿纱布包裹并密封,置于-20℃冰箱待测。
1.5 检
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