深低温冷冻对气管抗原递呈细胞及气管组织细胞活力的影响.pdf

㈧…㈧㈣111ll唧 Y1800320 目 录 0000000 000 0………1 中文摘要………………………………………………0 英文摘要…………………………………………………………………4 研究论文深低温冷冻对气管抗原递呈细胞及气管组织细胞活力 的影响 前言···········································································8 刖舌“””””””””””””””””””””””““““””“”””””“”‘毯 材料和方法…………………………………………………………9 结果···········································································13 附图…………………………………………………………………15 附表…………………………………………………………………20 讨{仑·························································…···············23 结论····-·················………····················…·····…·············25 参考文献……………………………………………………………30 综述深低温冷冻对气管抗原递呈细胞及气管组织细胞活力 O000OOOOOO00000………………………………………33 的影响……OOO 致谢·················································································45 个人简历…………………………………………………………………46 中文摘要 深低温冷冻对气管抗原递呈细胞及气管组织细胞活力的影响 摘 要 目的：因先天性疾病、炎症、肿瘤及其他原因引起的气管广泛性狭 窄而需行长段气管的切除与重建在临床上并不少见。但气管由于其特殊的 解剖生理特点，当其切除长度超过6锄时由于张力过大将无法吻合。为保 持气道的畅通，各种方式的气道重建应运而生。目前有人工气管替代、自 体组织代气管、生物医学与组织工程重建气管及气管移植。其中气管移植 被认为是气管重建的首选方法。由于气管移植和其他器官一样具有免疫原 性，移植后会发生免疫排斥反应。对于需要进行气管移植的患者来说，火 多数是肿瘤患者应用免疫抑制剂不仅影响术后恢复，并可导致癌症复发。 因而近年来深低温冻储后的气管移植备受嘱目。冷冻包括低温(高于． 后的组织可以保持其原有的活性和组织完整性，并能削减其免疫原性，这 样既解决了供体的保存问题，又解决了移植后免疫排斥反应的控制问题。 为了解超深低温(．196"C)条件下气管组织细胞的免疫原性及存活力， 我们利用免疫组化方法观察大鼠气管组织的树突状细胞，以明确其免疫原 性的变化；采用3H．TdR(3H．胸腺嘧啶核苷)体外培养的方法检测细胞活 力。 中心。随机分为6组、将其中一组做对照组。切取2．5．3．5cm气管，切取 其边缘，用免疫组化(OX．62标记)检测树突状细胞的表达，将气管段 分别移入注满冷冻保护液的冻储管(2m1)中，每管中放一段气管，使冷 冻保护剂充分浸润气管，旋紧管帽。放置于4。C冰箱中平衡4小时，采用 程控降温仪程序降温，降温速率1℃／分，降至．80℃迅速投入液氮中保存。 24小时，第1 气管软骨环，经复温后与新鲜气管做比较，将剩余气管采用体外培养的方 法分析细胞功能和活力，并检测树突状细胞的表达。 组织病理采用石蜡切片HE染色观察，免