微生物复习习题程序.doc

1 简述微生物在生命科学发展中的地位并描绘其前景 促进许多重大理论问题的突破：生命科学由整体或细胞研究水平进入分子水平，取决于许多重大理论问题的突破，其中微生物学起了重要甚至关键的作用，特别是对分子遗传学和分子生物学的影响最大。（2）对生命科学研究技术的贡献：20世纪中后期，由于微生物学的消毒灭菌、分离培养等技术的渗透和应用的拓宽及发展，动、植物也可以像微生物一样在平板或三角瓶中培养，可以在显微镜在进行分离，甚至可以像微生物的工业发酵一样，在发酵罐中进行生产。20世纪70年代，由于微生物学的许多重大发现，包括质粒载体、限制性内切酶、连接酶、反转录酶等，才导致了DNA重组技术和遗传工程的出现，使整个生命科学翻开了新的一页。（3）微生物与“人类基因组计划”：微生物起到了先行的模式生物的作用，加快了人类基因组计划的进展 前景：微生物基因组学研究将全面展开；与环境密切相关的微生物学研究将获得长足发展；微生物生命现象的特性和共性将更加受到重视；与其他学科实现更广泛的交叉，获得新的发展；微生物产业将呈现全新的局面。 2 试述列文虎克巴斯德和科赫在微生物学发展史上的杰出贡献。为什么说巴斯德和科赫是微生物学的奠基人 列文虎克：自制单式显微镜，观察到细菌等微生物的个体；出于个人爱好对一些微生物进行形态描绘。是微生物学的先驱者。 巴斯德：A、对微生物研究从形态转向生理，微生物致病作用的发现，对发酵的研究有突出贡献；B、医学上使免疫学成为一门独立科学，奠定了传染病微生物病原说的基础，同时发明了制造疫苗的方法和预防接种；C、证实微生物活动，否定了微生物自然发生说，提出了生命只能来自生命的胚种学说；D、创造了有效的灭菌方法。是微生物学的奠基人。? 科赫：A、具体证实了炭疽病、肺结核病的病原菌；B、发明了科赫定理。用来验证一种特殊类型的细菌引起一种特有的疾病，为疾病的病原说建立了牢固的基础。C：建立微生物学基本研究技术。是细菌学的奠基人。 3 何为无菌技术，列举属于无菌技术范围的具体实验操作环节及注意事项 在分离转接及培养纯种微生物时防止其被环境中的微生物污染企业，其自身也不污染环境的技术 4 如果希望从环境中分离得到厌氧固氮菌,你该如何设计实验? 根据选择分离的原理设计不含氮的培养基，在这种培养基上生长的细菌其氮素应来自固氮作用 将环境用品，例如土样，稀释涂布到选择平板上，放置于厌氧罐中对厌氧罐，采用物理化学方法除去氧气保留氮气培养后在平板上生长出来的细菌应是厌氧固氮菌和兼性厌氧固氮菌 挑选一定数量的菌落，对应点种到两块缺氮的选择平板上，分别放置于厌氧罐中，外保温培养。在厌氧罐内外均能生长的为兼性厌氧固氮菌，而在厌氧罐外的平板上不生长，在厌氧罐内的平板上生长的既为可能的厌氧固氮菌。 对分离得到的厌氧固氮菌菌落样品进行系列稀释，涂布于相应的选择平板，重复上述步骤，直到获得厌氧固氮菌的纯培养 5 细菌的一般构造和特殊构造作一介绍。 一般机构 细胞壁 细胞膜 细胞质 内含物 储藏物 间体 核糖体 核区 特殊结构 糖被 荚膜 微荚膜 粘液层 凝胶团 鞭毛、菌毛、性菌毛 芽孢 6 请列表比较细菌的鞭毛、菌毛和性毛间的异同。依据鞭毛的数目和着生位置不同,可将鞭毛菌分为哪几种类型? 单端鞭毛菌，端生丛毛菌，两端鞭毛菌和周毛菌 7 阐述革兰氏染色的主要步骤（按顺序）、所用染料试剂、两种染色结果（颜色）、染色机制和关键步骤。 革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是：1）涂片固定。2）草酸铵结晶紫染1分钟。3）自来水冲洗。4）加碘液覆盖涂面染约1分钟。5）水洗，用吸水纸吸去水分。6）加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，20秒后水洗，吸去水分。7）蕃红染色液（稀）染2分钟后，自来水冲洗。干燥，镜检。 草酸铵结晶紫碘液蕃红染色液（稀） 革兰氏阳性菌都呈紫色，革兰氏阴性菌都呈红色。 通过结晶紫液初染和碘液媒染后，在细菌的细胞壁以内可形成不溶于水的结晶紫与碘的复合物G+细菌由于其细胞壁较厚丶肽聚糖网层次多和交联致密，故遇脱色剂乙醇处理时，因失水而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇的处理不会溶出缝隙，因此能把结晶紫与碘的复合物牢牢留在壁内，使其保持紫色。反之，G-细菌因其细胞壁薄丶外膜层类脂含量高丶肽聚糖层薄和交联度差，遇脱色剂乙醇后，以类脂为主的外膜迅速溶解，这时薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此细胞退成无色。这时，再经沙黄等红色染料复染，就使G-细菌呈现红色，而G+细菌则仍保留最初的紫色了。 染色时，乙醇脱色是革兰氏染色操作的关键环节，脱色不足，阴性菌被误染成阳性菌，脱色过度，阳性菌被误染成阴性菌，脱色时间一般为20~30s。 8