第十三章基因表达的调节基因表达调节的基本概念与原理原核.pptVIP

第 一 节基本概念与原理 第 二 节  原核生物基因转录调节 2、色氨酸操纵子的转录弱化调节 色氨酸操纵子负责色氨酸的生物合成，编码5种酶的基因（ trpE、trpD、trpC、trpB、trpA ）紧密连锁在一起，当培养基中有足够的色氨酸时，操纵子自动关闭，缺乏色氨酸时操纵子被打开。 色氨酸或与其代谢有关的某种物质在阻遏基因表达过程中起作用。由于trp操纵子参与生物合成而不是降解，因此它不受葡萄糖或cAMP-CAP的调控。? ?前导序列由162个核苷酸组成，分为1、2、3、4区域，四个区域根据需要彼此互补结合，形成特殊的二级结构，达到调节基因表达的目的。 其中一部分序列编码了一个含14个氨基酸的前导肽。该多肽内含有两个相邻的色氨酸。正是这两个相连色氨酸的密码子（组氨酸、苯丙氨酸操纵子中都有这种现象）调控了色氨酸操纵子结构基因的表达。 当培养基中Trp浓度很低时，Trp-tRNA含量减少，这样翻译通过两个相邻Trp密码子的速度就会很慢，当4区被转录完成时，核糖体才进行到1区（或停留在两个相邻的Trp密码子处），这时的前导区结构是2-3配对，不形成3-4配对的终止结构，RNA-pol继续前进转录，直到将trp操纵子中的结构基因全部转录完成。 ? 当培养基中Trp浓度较高时，核糖体可顺利通过两个相邻的Trp密码子，在4区被转录之前就到达2区，使2-3区不能配对，3-4区自由配对形成茎环终止子结构，转录被终止，trp操纵子被关闭。 调节基因表达的RNA，称为调节RNA。 反义RNA：细菌中的一种调节RNA,含有与特定mRNA翻译的起始部位互补的序列，通过与mRNA的杂交阻断30S小亚基对AUG的识别及与SD序列的结合，抑制翻译的起始。 反义RNA的调节作用，称为反义控制。 第 三 节 真核生物基因转录调节 常结合DNA的GC盒，也有与mRNA结合的功能。 同质异形结构域 由60个氨基酸残基组成，结构与HTH相似。 在真核生物发育，如身体形成期间起作用。 编码这种结构域的DNA序列，叫做同质异形盒。 （2）调节蛋白中 蛋白质-蛋白质相互作用结构域 绝大多数调节蛋白质结合DNA前，需通过蛋白质-蛋白质相互作用，形成二聚体或多聚体。（同质或异质） 也有的是在结合DNA前，需要蛋白质与蛋白质之间的解聚过程 二聚体 亮氨酸之间相互作用形成二聚体，形成“拉链” 。 肽链氨基端20～30个富含碱性氨基酸结构域与DNA结合。 亮氨酸拉链(zip) 亮氨酸拉链 碱性螺旋-环-螺旋(HLH) 可形成二聚体 由50个氨基酸残基的保守区组成 肽环长度可变 碱性螺旋与DNA结合 4、RNA聚合酶 DNA顺式作用元件、调节蛋白对转录激活的调节最终是由RNA聚活酶的活性体现的。 启动子的结构、调节蛋白的性质对RNA聚活酶活性影响最大。 ⑴ 启动序列与RNA聚合酶活性 启动子有强弱只分，原核、真核启动子碱基序列影响RNA聚合酶与其亲和力，进而影响转录启动频率。 启动子序列的差别，使细胞中不同的管家基因在不同的水平表达。 ⑵ 调节蛋白与RNA聚合酶活性 启动序列决定基础转录频率，一些特异调节蛋白在适当环境信号（如诱导剂和阻遏剂等）刺激下在细胞内表达，然后通过DNA-蛋白质、蛋白质-蛋白质相互作用影响RNA聚合酶活性，使基础转录频率发生变化，从而引起表达的变化。 ——调节的主要环节在转录起始 一、原核生物基因转录调节特点 （1）σ因子决定RNA聚合酶识别特异性 ——只有一种RNA-pol，但是有很多种σ因子 （2）操纵子模型的普遍性 —功能相关基因成簇串联通过单个启动子协调表达 （3）阻遏蛋白与阻遏机制的普遍性 ——原核生物主要以这种负调节方式为主 二、乳糖操纵子调节机制 （1）乳糖操纵子(lac operon)的结构 结构基因 Z： β-半乳糖苷酶 Y： 透酶 A：乙酰基转移酶 调控区 CAP结合位点 启动序列 操纵序列 Z Y A O P DNA mRNA 阻遏蛋白 I DNA Z Y A O P pol 没有乳糖存在时 （2）阻遏蛋白的负性调节 调节基因 mRNA 阻遏蛋白 有乳糖存在时 I DNA Z Y A O P pol 启动转录 mRNA 乳糖 半乳糖 β-半乳糖苷酶 CAP—降解物基因活化蛋白 CAP-cAMP复合物 CAP + + + + 转录 无葡萄糖，cAMP浓度高时 有葡萄糖，cAMP浓度低时 （3）CAP的正性调节 Z Y A O P DNA CAP CAP CAP CAP CAP CAP