HPLC-ESD法测定注射用灯盏花素中甘露醇的含量.pdfVIP

HPLC-ELSD法测定注射用灯盏花素中甘露醇的含量 杨学军1李金兰2 1.湖南衡阳食品药品检测中心2.南华大学药理研究所，衡阳421001 摘要 目的:建立注射用灯盏花素中甘露醇的含量测定方法。方法:采用HPLC-ELSD法，使用氨基柱，流动相为乙腈-水 (83∶17)；ELSD漂移管温度 （85±5）℃；空气流速2.4L·min-1；柱温:30℃。结果:甘露醇在进样量为1.0324～30.972μg时 线性关系良好，回归方程为Y=1.3121X+11.715(r=0.9995)；回收率分别为97.92％，102.58％.100.72％.RSD分别为 0.06％,0.04％,0.05％。结论:本法结果准确，便于操作，可作为注射用灯盏花素中辅料甘露醇的质量控制方法之一。 关键词:HPLC-ELSD;注射用灯盏花素；辅料；甘露醇 T第heJ3rd届Na全tion国al F药orum品of质Dr量ugQ分ual析ity论Cont蓦ro会刊l五IU 含量的测定多为比色法或滴定法等，在实验操作和准确度上欠佳。本实验用蒸发光散射一高效液相色谱法 (ELSD—HPLC)测定注射用灯盏花素中甘露醇含量，该方法操作简便、快速灵敏、重现性好，可作为该制剂质 量控制指标之一。 1仪器与试药 Waters 2695高效液相色谱仪，Waters Two色谱管理 2424蒸发光散射检测器；气体为压缩空气；Empower 软件；乙腈为色谱纯，水为重蒸馏水，其余试剂为分析纯；甘露醇对照品购自中国食品药品检定研究院(批号 mL：50 100534—200305)，甘露醇由市场购得(河南华利药业有限公司规格250 g)。 2方法与结果 mm×200 2．1色谱条件色谱柱：Thermo氨基柱(4．6 mL·min～；柱温：常温；ELSD漂移管温度：(85±5)℃；气压：30 psi，增益：50。进样量：20斗L。 2．2溶液的制备 2．2．1对照品溶液精密称取经五氧化二磷减压干燥24h的甘露醇对照品25 mL量瓶中，用 mg，置于25 流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备液。 2．2．2供试品溶液精密称取注射液灯盏花素粉末130mg，置于50mL量瓶中，加水溶解并稀释至刻度， 摇匀，作为供试品溶液。 2．2．3阴性对照品溶液按注射用灯盏花素的处方制备不含甘露醇的阴性对照品，按制备供试品溶液的制 备方法制备阴性对照品溶液。 2．3专属性试验精密量取对照品、供试品及阴性对照溶液，按“2．1”项下色谱条件进行分析，记录色谱 图，阴性对照在此条件下没有吸收峰，不干扰甘露醇的测定，见图l—A、B、C(图略)。 2．4检测限与定量限取甘露醇对照品，用水溶解并逐步稀释，计算检测限为1．0324峭，以进样量20斗L 基线噪音的10倍值为最低定量限计算，样品中甘露醇的最低定量限为9．1205 P．g。 HPLC分析。以对照品进样量的自然对数(1Ilx)为横坐标，以峰面积的自然对数(1IIY)为纵坐标，进行线性 回归，回归方程为：Y=1．3121X+11．715(r=0．9995)，线性范围是1．0324—30．972 lag。 2．6精密度试验取“2．5”项下的浓度为8mg·L一的对照品溶液，在上述色谱条件下，连续进样6次，每 次20¨L。测得的峰面积的RSD为0．27％，结果表明精密度良好。 2．7重复性试验取同一批(批样品，精密称取粉末26．7rIlg，共6份，按“2．2．2”项下方