第七章 原核基因表达调控_张铁军.pptVIP

（二） trp操纵子的结构 阻遏型操纵子 trpA trpB trpC trpE trpD Ptrp Otrp 前导序列 a Trp 阻抑物 色氨酸 激活 RNA trpE trpD trpC trpB trpA 色氨酸合成所需的酶 trpR 酶阻遏的操纵子模型 辅阻遏蛋白无活性，不能与操纵基因结合，结构基因表达. 调节基因 操纵基因 结构基因 mRNA 酶蛋白 .. . .. .. .. 辅阻遏蛋白 （三） trp操纵子的阻遏调控机制 色氨酸操纵子主要参与调控一系列用于色氨酸合成代谢的酶蛋白的转录合成。当细胞内缺乏色氨酸时，此操纵子开放，而当细胞内合成的色氨酸过多时，此操纵子被关闭。 色氨酸操纵子的调控机制与乳糖操纵子类似，但通常情况下，操纵子处于开放状态，其辅阻遏蛋白不能与操纵基因结合而阻遏转录。 而当色氨酸合成过多时，色氨酸作为辅阻遏物与辅阻遏蛋白结合而形成阻遏蛋白，后者与操纵基因结合而使基因转录关闭。 Trp Trp 浓度高时 Trp浓度低时 mRNA O P trpR 调节区 结构基因 RNA聚合酶 RNA聚合酶 色氨酸操纵子 －阻遏调节 二、 弱化子与前导肽 （一）弱化子 在操纵区与结构基因之间的一段可以终止转录作用的核苷酸序列，当操纵子被阻遏时，RNA合成被终止，这段核苷酸起终止转录信号作用. 调节区 结构基因 trpR O P 前导序列 弱化子区域 UUUU…… 前导mRNA 1 2 3 4 UUUU…… RNA聚合酶 起调节作用的是某种氨酰-tRNA的浓度 UUUU…… 3 4 UUUU 3’ 3 4 核糖体 前导肽 前导mRNA 1.当色氨酸浓度高时 转录衰减机制 1 2 5’ trp 密码子 弱化子结构 就是终止子 可使转录 前导DNA UUUU 3’ RNA聚合酶 终止 （二）前导肽 UUUU…… 3 4 2 4 2 3 UUUU…… 核糖体 前导肽 前导mRNA 1 5’ trp 密码子 结构基因 前导DNA RNA聚合酶 当色氨酸浓度低时 Trp合成酶系相关 结构基因被转录 序列3、4不能形成弱化子结构 5’ trp mRNA trpL 1 2 3 4 寡聚U区 trpE (a) 正常 (b) 高 [Trp] 1 2 转录终止 3 4 (C) 低[Trp] 1 2 3 4 转录延伸 （三）弱化子的生物学意义 活性阻遏物和非活性阻遏物的转变可能较慢，而tRNA荷载与否可能更为灵敏； 氨基酸的主要用途是合成蛋白质，因而以tRNA荷载情况为标准来进行控制可能更为恰当. 当细胞内氨基酸高于某一水平时，可以实现完全的阻遏；而只有低于这一水平时，才需用弱化子这个调节系统来进行调节，阻遏蛋白和弱化子调节机制都是为了避免浪费，提高效率。 第四节 其他操纵子（自学） 第五节 固氮基因调控（自学） 第六节 转录后调控 一、翻译起始的调控 1、SD序列对翻译的影响 SD序列：mRNA起始密码前的一段富含嘌呤核苷酸的序列。(9-12bp) 5′-AGGAPuPuUUUPuPuAUG-3′ SD序列的顺序及位置对翻译的影响 SD与AUG之间相距一般以4-10个核苷酸为佳，9个核苷酸最佳。 实验证据 RNA引物由dnaG基因编码的引物酶催化合成 dnaG、rpoD及rpsU属于大肠杆菌基因组上的同一个操纵子 基因转录出来的三个蛋白相应的mRNA拷贝数大体相同，由于翻译的调控使得蛋白的拷贝数发生了很大的变化。 二、稀有密码子对翻译的影响 由于细胞内对应于稀有密码子的tRNA较少，高频率使用这些密码子的基因翻译过程容易受阻，影响了蛋白质合成的总量。 三、重叠基因对翻译的影响 A基因 B基因 A基因终止密码子与B基因的起始密码子重叠 重叠的密码保证了同一核糖体对两个连续基因进行翻译的机制。 偶联翻译是保证两个基因产物在数量上相等的重要手段。 重叠基因对翻译的影响 trp操纵子trpE基因与trpD基因的翻译偶联机制 trpE－苏氨酸－苯丙氨酸－终止 ACU------UUC------UGA-----UGG----CU AUG----GCU 甲硫氨酸－丙氨酸－trpD 四、魔斑核苷酸水平对翻译的影响 魔斑核苷酸：pppGpp，ppGpp。这两种化合物实在层析谱上检出的斑点，当时称为魔斑。 空载氨酰-tRNA对蛋白质和RNA的合成速度进行调控 （一）严紧控制和松散控制 1、严紧控制（基因型rel＋） 当细菌处于饥饿条件下，缺乏维持蛋白质合成的氨基酸，其大部分活性区域将被关闭，此称之为严禁