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* 1 方法: 诱导方式 物理法 化学法 生物法: 灭活的病毒 仙台病毒 丧失感染性 (不感染细胞) 保留融合活性 紫外线 (诱导细胞融合) 2.方法: 灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面 细胞膜被病毒颗粒穿通 细胞膜连接 细胞融合,形成杂种细胞 (细胞膜具有一定的流动性) 总结:比较植物体细胞杂交和动物细胞融合 用 途 诱 导 方 法 融合前处理 原 理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 细胞膜的流动性、 植物细胞的全能性 细胞膜的流动性 用纤维素酶、 果胶酶去壁 用胰蛋白酶 使细胞分散 物理、化学方法 物理、化学、 生物方法 获得部分 或完整植株 主要用于制备 单克隆抗体 1.抗体由何种细胞产生? 2.抗体主要分布在哪里? 3.如何得到抗体? 提问 ? ②特点:产量低、特异性差、纯度低、反应不够灵敏 常规抗体制备 一个B淋巴细胞:只分泌一种特异性抗体 单克隆抗体 杂交瘤细胞 小鼠骨髓瘤细胞:能无限增殖 融合 单克隆抗体 培养 ①向动物体内反复注射抗原,使动物产生抗体,然后从血清中分离所需抗体。 杂交 细胞 灭活的病毒等手段 小鼠骨髓瘤细胞 B淋巴细胞 经免疫的小鼠 提取 杂交瘤细胞 第一次筛选 用特定的选 择性培养基 第二次筛选 能产生特定抗体、培养条件下能无限增殖的杂交瘤细胞 体外培养 注射到小鼠腹腔 提取单克隆抗体 B BB B瘤 瘤瘤 瘤 细胞融合后培养液中有几种细胞? 筛选杂种细胞 已知细胞合成DNA有D和S两条途径,其中D途径能被氨基嘌呤阻断。B淋巴细胞中有这两条DNA合成途径,但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径,但能不断分裂增殖。 单克隆抗体的应用: ⑴在疾病诊断、治疗和预防方面,具有特异性强、纯度高、灵敏度高、产量大、容易标准化生产等优点。 ⑵单克隆抗体可以作为载体,运载抗癌药物,形成“生物导弹”,治疗恶性肿瘤。 1.动物细胞融合的目的中最重要的是----------------( ) A.克服远缘杂交不亲和 B. 制备单克隆抗体 C.培育新品种 D.生产杂种细胞 2.动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较中,正确的是( ) 诱导融合的方法完全相同 B.所用的技术手段基本相同 C. 所采用的原理完全相同 D. 都能形成杂种细胞 B D 3. 单克隆抗体制备过程中培育的杂交细胞是------( ) A.由小鼠能产生抗体的B淋巴细胞与肝细胞融合 B.由小鼠一个B淋巴细胞诱导融合而成 C.由小鼠一个B淋巴细胞与肌瘤细胞诱导融合而成 D.由小鼠一个B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合而成 D *
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