2-10DNAreplication-jiangjikai-08-生物化学与分子生物学精品.PPT

第三篇 基因信息的传递 Central Dogma 描述遗传信息流动的方向 第一节 复制的基本规律 Basic Rules of DNA Replication 一、半保留复制的实验依据和意义 二、双向复制 原核生物复制时，DNA从起始点(origin)向两个方向解链，形成两个延伸方向相反的复制叉，称为双向复制。 真核生物每个染色体有多个起始点，是多复制子的复制。 习惯上把两个相邻起始点之间的距离定为一个复制子(replicon) 。复制子是独立完成复制的功能单位。 聚合反应的特点 DNA 新链生成需引物和模板； 新链的延长只可沿5? → 3?方向进行 。 二、DNA聚合酶 全称：依赖DNA的DNA聚合酶 (DNA-dependent DNA polymerase,DDDP) 简称：DNA-pol 引物酶 复制是在一段RNA引物的基础上进行的，催化引物合成的是一种RNA聚合酶，它不同于催化转录过程的RNA聚合酶，因此称为引物酶。 DDRP —— DNA dependent RNA polymerase 由于DDDP不可以催化两个单dNTP之间的反应，DDRP可以催化两个NTP起始合成小的RNA片断 引物酶合成的小的RNA片断称为“引物”，为DNA的合成提供 3’－OH ? 细胞能否分裂，决定于进入S期及M期这两个关键点。G1→S及G2→M的调节，与蛋白激酶活性有关。 ? 蛋白激酶通过磷酸化激活或抑制各种复制因子而实施调控作用。 ? 真核生物每个染色体有多个起始点，是多复制子复制。复制有时序性，即复制子以分组方式激活而不是同步起动。 ? 复制的起始需要DNA-polα（引物酶活性）和polδ（解螺旋酶活性）参与。还需拓扑酶和复制因子(replication factor, RF)。 ? 增殖细胞核抗原(proliferation cell nuclear antigen, PCNA)在复制起始和延长中起关键作用。 DNA分子上的碱基错配称点突变(point mutation)。 发生在同型碱基之间，即嘌呤代替另一嘌呤，或嘧啶代替另一嘧啶。 1. 转换 发生在异型碱基之间，即嘌呤变嘧啶或嘧啶变嘌呤。 2. 颠换 （一）错配 镰形红细胞贫血病人Hb (HbS) β亚基 N-val · his · leu · thr · pro · val · glu · · · · · · C 肽链 CAC GTG 基因 正常成人Hb (HbA)β亚基 N-val · his · leu · thr · pro · glu · glu · · · · · · C 肽链 CTC GAG 基因 （二）缺失、插入和框移 缺失：一个碱基或一段核苷酸链从DNA大分子上消失。 插入：原来没有的一个碱基或一段核苷酸链插入到DNA大分子中间。 框移突变是指三联体密码的阅读方式改变，造成蛋白质氨基酸排列顺序发生改变。 缺失或插入都可导致框移突变。 谷 酪 蛋 丝 5’ ……G C A G U A C A U G U C …… 丙 缬 组 缬 正常 5’ ……G A G U A C A U G U C …… 缺失C 缺失引起框移突变 （三）重排 DNA分子内较大片段的交换，称为重组或重排。 由基因重排引起的两种地中海贫血基因型 四、DNA损伤的修复 修复(repairing) 是对已发生分子改变的补偿措施，使其回复为原有的天然状态。 光修复(light repairing) 切除修复(excision repairing) 重组修复(recombination repairing) SOS修复 修复的主要类型 （一）光修复 光修复酶(photolyase) UV 光修复过程是通过光修复酶催化而完成的，需300－600nm波长照射激活 UvrA UvrB UvrC OH P DNA聚合酶Ⅰ OH P （二）切除修复 是细胞内最重要和有效的修复机制，主要由DNA-polⅠ和连接酶完成。 DNA连接酶 ATP E.coli的切除修复机制 （三）重组修复 这是DNA的复制过程中所采用的一种有差错的修复方式。 (recombination repairing) DNA分子受到较大范围损伤,使复制受到抑制时这种修复机制用SOS借喻细胞处于危急状态。 ?损伤诱导一种特异性较低的新的DNA聚合酶，以及重组酶等的产生。继续催化损伤部位DNA的复制。 ?通过SOS修复，复制如能继续，细胞是可存活的。然而DNA保留的错误较多