土壤有效磷的测定碳酸氢钠提取—钼锑抗比色法olsen法.docVIP

土壤有效磷的测定 A 碳酸氢钠提取—钼锑抗比色法(olsen法) 1、方法提要 碳酸氢钠溶液除可提取水溶性磷外，也可以抑制Ca2+的活性，使一定量活性较大的Ca-P盐类中的磷被浸出，也可使一定量活性Fe-P和Al-P盐类中的磷通过水解作用而浸出。由于浸出液中Ca、Fe、Al浓度较低，不会产生磷的再沉淀。浸提液中的磷可用钼锑抗比色法定量测定。土壤浸出的磷量与土液比、液温、振荡时间及方式有关。本法严格规定土液比为1：20，浸提液温度为25℃±1℃，振荡提取时间为30min。 2、适用范围 本方法适用于石灰性土壤有效磷含量的测定；中性土壤及水稻土也可参照使用。 3、主要仪器设备 3.1分光光度计或紫外—可见分光光度计； 3.2恒温(25℃±1℃)往复式或旋转式振荡机，或普通振荡机及恒温室，满足180r/min±20r/min的振荡频率或达到相同效果； 3.3塑料瓶，200mL； 3.4无磷滤纸。 4、试剂 4.1无磷活性碳粉：如所用活性含磷，应先用1：1盐酸溶液浸泡24h，然后移至平板漏斗抽气过滤，用水淋洗到无Cl-为止(约4~5次)，再用碳酸氢钠浸提剂浸泡24h，在平板漏斗上抽气过滤，用水洗尽碳酸氢钠，并至无磷为止，烘干备用； 4.2氢氧化钠溶液[ρ(NaOH)=100g·L-1]：称取10g氢氧化钠溶于100mL水中； 4.3碳酸氢钠浸提剂[ρ(NaHCO3)=0.5mol·L-1，PH=8.5]称取42.0g碳酸氢钠(NaHCO3)溶于约950mL水中，用100g·L-1氢氧化钠溶液调节PH至8.5(用酸度计测定)，用水稀释至1L。贮存于聚乙烯瓶或玻璃瓶中备用。如贮存期超过20d，使用时须重新校正PH； 4.4酒石酸锑钾溶液[ρ(K(SbO)C4H4O6·H2O)=3g·L-1]：称取0.3酒石酸锑钾溶于水中，稀释至100mL； 4.5钼锑贮备液：称取10.0g钼酸铵[(NH4)6Mo7O24·4H2O]溶于300mL约60℃水中，冷却。另取181mL浓硫酸缓缓注入800mL水中，搅匀，冷却。然后将稀硫酸注入钼酸铵溶液中，搅匀，冷却。再加入100mL3 g·L-1酒石酸锑钾溶液，最后用水稀释至2L，盛于棕色瓶中备用； 4.6钼锑抗显色剂：称取0.5g抗坏血酸(C6H8O6左旋，旋光度+21~22°)溶于100mL钼锑贮备液中。此溶液有效期不长，应用时现配。 4.7磷标准贮备液[ρ(P)=100μg·mL-1]：准确称取经105℃下烘干2h的磷酸二氢钾(优级纯)0.4390g，用水溶解后，加入5mL浓硫酸，然后加水定容至1000mL。该溶液放入冰箱可供长期使用； 4.8磷标准标准液[ρ(P)=5μg·mL-1]：吸取5.00mL磷标准贮备液于100mL容量瓶中，定容。该溶液用时现配。 5、分析步骤 称取通过2mm孔径筛的风干试样2.50g，置于200mL塑料瓶中，加入约1g无磷活性炭，加入25℃±1℃的碳酸氢钠浸提剂50.0mL，摇匀，在25℃±1℃温度下，于振荡器上用180r/min±20r/min的频率振荡30±1min，立即用无磷滤纸过滤于干燥的150mL三角瓶中。 吸取滤液10.00mL于25mL比色皿中，加入显色剂5.00mL，慢慢摇动，排出CO2后加水定容至刻度，充分摇匀。在室温高于20℃处放置30min，用空白溶液(以10.00mL碳酸氢钠浸提剂代替土壤浸提液，同上处理)为参比，用1cm光径比色皿在波长700nm处比色，测量吸光度。 标准曲线绘制：吸取磷标准溶液[ρ(P)=5μg·mL-1]0、0.5、1.00、1.50、2.00、2.50、3.00mL于25mL比色管中，加入浸提剂10.00mL，显色剂5mL，慢慢摇动，排出CO2后加水定容至刻度。此标准系列溶液中磷的浓度依次为0.00、0.10、0.20、0.30、0.40、0.50、0.60μg·mL-1。在室温高于20℃处放置30min后，按上述样品待测液分析步骤、条件进行比色，测量吸光度，绘制标准曲线或计算回归方程。 6、结果计算 有效磷(P)，mg·kg-1= 式中：ρ(P)—查标准曲线或求回归方程而得测定液中P的质量浓度，μg·mL-1； V—显色液体积，25mL； D—分取倍数，即试样提取液体积/显色时分取体积，本试验为50/10； m—风干试样质量，g； 平行测定结果以算术平均值表示，保留小数点一位 7、精密度 平行测定结果的允许误差 测定值(P，mg·kg-1) 允许差(P，mg·kg-1) ＜10 绝对差值≤0.5 10~20 绝对差值≤1.0 ＞20