血府逐瘀胶囊、血塞通胶囊对溶血磷脂酸诱导的血管平滑肌细胞增殖的影响论文.docVIP

　　血府逐瘀胶囊、血塞通胶囊对溶血磷脂酸诱导的血管平滑肌细胞增殖的影响论文 .freels containing Xuefuzhuyu capsules and Xuesetong capsules on the proliferation of vascular smooth muscle cells (VSMC) induced by 1ysophosphatidie acid (LPA). Methods Rat VSMCs group,.freel group, LPA＋Xuefuzhuyu (Xuesetong, captopril) containing serum group and LPA＋blank serum group. Effects of different groups on the proliferation of VSMCs etry. Analysis of cell cycle and DNA content ed by floetry. Results The optical density (OD) and the S phase fraction (SPF) of LPA＋blank serum group and Xuefuzhuyu capsules-containing serum group ore increased than the blank serum group (P＜0.05, P＜0.01). In parison group, OD of LPA＋Xuefuzhuyu capsules-containing serum group and LPA＋Xuesetong capsules- containing serum group oted the proliferation of VSMCs in vitro. Xuefuzhuyu and Xuesetong capsules can inhibit the proliferation induced by LPA, and effect of Xuesetong capsules echanism may be associated G0/G1 to S phase of VSMCs． Key ooth muscle cell；drug-containing serum 动脉血管平滑肌细胞(VSMC)的增殖是经皮冠状动脉成形术后再狭窄的主要病理特征,有研究表明,心肌梗死后患者血清中含量明显升高的溶血磷脂酸(LPA)可促进血管平滑肌细胞的增殖1、迁移2和去分化3,最终导致血管腔狭窄。活血化瘀中药可广泛用于心肌梗死后的干预治疗,作为其代表药物的血府逐瘀胶囊、血塞通胶囊对LPA诱导的VSMC增殖的影响还未见报道。本实验旨在观察血府逐瘀胶囊、血塞通胶囊含药血清对LPA诱导的体外大鼠VSMC增殖的不同影响,为活血化瘀药在心肌梗死及心肌梗死介入后的选用提供可靠的理论依据。现报道如下。 1 实验材料 1.1 动物 雄性SPF级SD大鼠50只,体重180～230 g,购自军事医学科学院动物所,许可证号：SCXK-军2007-004。 1.2 药物 血府逐瘀胶囊,天津宏仁堂药业有限公司(批号F03302)；血塞通胶囊,昆明圣火制药有限公司(批；卡托普利,施贵宝公司(批号0407021)。 1.3 主要试剂 DMEM高糖培养基、特级胎牛血清(FBS),美国GIBCO公司；四甲基偶氮唑蓝(MTT)、LPA、二甲基亚砜(DMSO)、碘化丙啶(PI)、RNaseA、胰蛋白酶(1∶250),美国Sigma公司；小鼠抗大鼠平滑肌α肌动蛋白多克隆抗体(BM0002)、SP检测试剂盒(SP-9002)、DAB显色试剂盒,博士德生物公司。其余试剂均为国产分析纯。 1.4 主要仪器 恒温CO2培养箱,Sanyo(日本)；倒置显微镜,OLYMPUS(日本)；流式细胞仪,BD(美国)；酶标仪,BIO-TEK(美国)；细胞培养板,Corning(美国)。 2 实验方法 2.1 含药血清的制备 SD大鼠随机分为血府逐瘀胶囊组、血塞通胶囊组、卡托普利组、空白组,每组10只。按Meeh-Rubner氏公式给予10倍等效剂量的药物,充分溶于生理盐水后灌胃；空白组给予等体积的生理盐水灌胃。每日2次,连续3 d。第4日给药1次后1 h,腹主动脉采血,室温静置1 h,置4 ℃过夜。3 000 r/min离心15 min,取上清,经56 ℃、30 min灭活,0.22 μm滤膜过滤灭菌,-20 ℃保存备用。 2.2 动脉血管平滑肌细胞培养及鉴定 采用组织贴块法培养大鼠主动脉VSMC。戊巴比妥麻醉大鼠,严格