血管性痴呆大鼠海马胆碱乙酰基转移酶的动态变化论文.docVIP

　　血管性痴呆大鼠海马胆碱乙酰基转移酶的动态变化论文 张立红 周永翠 王玉良 【摘要】 目的 观察血管性痴呆（VD）模型大鼠海马组织胆碱乙酰转移酶（ChAT）与学习记忆功能的动态变化，探讨VD发病的可能机制。方法 采用双侧颈总动脉反复夹闭再灌注，同时腹腔注射硝普钠建立VD大鼠模型，在7、15 d、1、2、4个月等时间点，采用水迷宫检测大鼠学习记忆能力的变化，HE染色和免疫组化染色观察大鼠海马神经元的形态学改变及ChAT表达的变化。结果 模型组大鼠各时间点的逃逸潜伏期（EL）比假手术组均明显延长(P＜0.01)；海马区锥体细胞数比假手术组明显减少(P＜0.01)；免疫组织化学观察海马ChAT阳性神经元表达均显著少于假手术组(P＜0.01)。而且随造模手术后时间的延长，以上变化逐渐加重，与水迷宫EL呈负相关（r=-0.937,P＜0.05）。结论 缺血再灌注后.freelic changes of choline acetyltransferase（ChAT）in hippocampal neurons and the abilities of learning and memory of vascular dementia (VD) rats. Methods VD rat models iareperfusion. Morris aze emory, and HE staining and immunohistochemical staining orphology and ChAT expression in hippocampus. Results (1) The escape latency (EL) of model group operated (SO) group at different time point (P＜0.01). (2) The number of pyramidal neurons in hippocampal CA1 area of model group pus of model group ber of ChATpositive neurons aze test (r=-0.937,P＜0.05). Conclusions After ischemiareperfusion, the loss, denaturation and necrosis of cholinergic neurons in hippocampus are progressively severe and positively correlated emory impairment. These suggest that the loss and injuries of cholinergic neurons may play a key role in onset and development of VD. 【Key entia; ChAT; Learning and memory; Rat 近年来，人们对血管性痴呆（VD)发病的胆碱能机制进行了大量的研究，越来越多的证据表明，VD时中枢胆碱能系统受损〔1〕，其认知损害机制涉及胆碱能神经递质及其受体的改变〔2〕。但在VD发生与发展过程中，脑内胆碱能神经元长时间的动态变化及其与学习记忆的相关性有待进一步研究。胆碱乙酰基转移酶（ChAT）是胆碱能神经元的特殊标志。本实验通过行为学和免疫组织化学方法，观察脑缺血再灌注所致的VD模型大鼠海马ChAT活性及ChAT阳性神经元在VD发病中的动态变化，探讨VD模型大鼠学习记忆障碍的可能机制。 1 材料与方法 1.1 动物分组与处理 健康SD大鼠，3～4月龄，雄性，体重200～250 g，由解放军第89医院实验动物中心提供。动物购回后饲养3 d，观察无异常，用Morris水迷宫筛选出较灵活的大鼠60只，随机抽取50只采用王蕊〔3〕改进方法复制VD大鼠模型，其余10只作为假手术组。假手术组麻醉及手术过程同模型组，但不予阻断颈总动脉及注射硝普钠。术后7 d行Morris水迷宫检测，以假手术组大鼠游到平台平均时间的95％上限值为标准，将超出上限值的脑缺血再灌注大鼠确定为痴呆大鼠〔4〕。将造模成功的大鼠分为7、15 d、1、2、4个月时间点亚组，每亚组10只。在相应时间点检测相关指标。 1.2 Morris水迷宫试验 各组大鼠分别在造模后7、15 d,1、2、4个月进行Morris水迷宫定位航行实验〔5〕,检测反映大鼠空间学习和记忆能力改变的逃逸潜伏期（EL）。 1.3 HE染色和免疫组化染色 Morris水迷宫检测后，各组大鼠用生理盐水和4％多聚甲醛溶液经颈总动脉灌注取脑，至4％多聚甲醛后固定12 h，流水冲洗30