三黄片调及物外用抑菌作用实验探究.doc

三黄片调及物外用抑菌作用实验探究基金项目 甘肃省中医药管理局科研资助项目（GZK-2010-31） 摘 要 目的：观察三黄片用油或水调和后外用的局部抑菌作用。方法：选取A族乙型溶血性链球菌制作小鼠皮下细菌感染模型，研究三黄片油和水调和物对皮下细菌感染的保护作用。结果：三黄片水调和物大、小剂量及三黄片油调和物大剂量对小鼠皮下A族乙型溶血性链球菌感染有明显抑制作用，与基质对照组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；抑制作用从给药至第6天最明显。结论：三黄片调和物有明显抑菌作用 关键词 三黄片 调和物外用 抑菌作用 A族乙型溶血性链球菌 体表软组织感染是一种常见病，西医治疗效果欠佳；中药外用治疗软组织感染，疗效显著，临床将三黄片用油或水调和用于治疗体表软组织感染，效果较好。本实验将三黄片水调和物和油调和物分大、小剂量组，进行抑菌作用实验研究，以指导临床用药，对基层医疗发展，有重要指导意义 资料与方法 实验材料：①试剂三黄片，创新药业有限公司，国药准字批号0903341；食用调和油，西安市金龙鱼食品有限公司，西安市卫食证字［2008］第610100-0521号，批将三黄片研成细粉，加调和油，制备1:1（g/ml）调和物备用。将三黄片研成细粉，分别加调和油或蒸馏水，制备1:1（g/ml）调和物备用；A族乙型溶血性链球菌，甘肃中医学院病原教研室提供。②动物：昆明种小鼠112只，SPF级，雌雄各半，18～22g，20±2℃控温和光暗周期各12小时环境饲养，自由饮水，实验动物合格证号：SCXK（甘）2010-0001号，中国农业科学院兰州兽医研究所实验动物中心提供 方法：①小鼠皮下细菌感染模型制作及方法学研究【sup】［1］【/sup】：取小鼠40只，雌雄兼用，实验前24小时，用8%Na【sub】2【/sub】S背部脱毛，面积约2cm×2cm，按体重随机分为8组。取适当浓度A族乙型溶血性链球菌菌液，用平皿表面活菌计数法测定菌液活菌数，浓度8.0×10【sup】8【/sup】CFU（个）/ml，用5%高活性干酵母以10倍稀释成不同浓度的受试菌液，分别取3ml菌液加入7ml琼脂（3%，NS，60℃保温）制备染菌载体，分别取染菌载体0.4ml于小鼠背部脱毛区皮下注射，隆起皮丘者纳入试验，对各小鼠于注射后24小时，第2～7天按评分标准评分，以7天内引起100%死亡（评分总分值50）的最小菌液浓度作为实验时进行感染动物的菌液浓度［结果得最小菌液浓度2.4×10【sup】4【/sup】CFU（个）/ml］。②三黄片调和物对小鼠皮下细菌感染的保护作用：取小鼠72只，雌雄兼用，体重18～22g，随机分成6组，每组12只，设空白对照组、阳性对照组、三黄片油和水调和物大剂量组和小剂量组。给药前动物背部两侧脱毛。各组小鼠分别在脱毛区涂调和油0.4g/只、鱼石脂软膏0.2g/只、三黄片油调和物0.4g/只、三黄片油调和物0.2g/只、三黄片水调和物0.4g/只、三黄片水调和物0.2g/只，1次/日，连续3天，末次给药6小时后，空白对照组各小鼠皮下注射3%琼脂0.4ml，其余各组小鼠以终浓度2.4×10【sup】4【/sup】CFU（个）/ml皮下注射染菌载体0.4ml，注意无菌操作。继续涂药，连续6天，每次涂药前按表10给每只小鼠评分，记录总分值，组间差异采用秩和检验，结果，见表1 统计学处理：所得数据应用SPSS13.0统计软件包进行方差分析，组间资料比较用t检验，P＜0.05表示差异有统计学意义 结 果 三黄片水调和物大、小剂量及三黄片油调和物大剂量对小鼠皮下A族乙型溶血性链球菌感染有明显抑制作用，与基质对照组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；抑制作用从给药至第6天最明显 讨 论 体表软组织感染是常见病，多发病，中医药外用治疗软组织感染等疾病历史悠久，药物通过皮肤吸收，直达病所，疗效确切，物美价廉，在诸多领域有独特优势。三黄片是一种临床常用的中成药，具有清热解毒、泻火通便作用，在缺少外用药的基层，将三黄片用水或油调和外用，治疗体表软组织感染，取得了较好的疗效【sup】［2］【/sup】。一般认为三黄片由东汉张仲景《金匮要略》泻心汤方剂得来，1997年收载于部版标准【sup】［3］【/sup】，由大黄、黄芩、黄连3味药组成；含有大黄素、大黄酚、盐酸小檗碱、黄芩苷等主要成分，是祖国医学宝库中的传统有效方剂【sup】［4］【/sup】，临床研究三黄片中黄芩黄连煎剂对痢疾杆菌、白喉杆菌、绿脓杆菌、伤寒杆菌、副伤寒感菌、变形杆菌、金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、肺炎双球菌、肺炎双球菌、脑膜炎球菌、霍乱弧菌以及金黄色葡萄球菌皆有较强的抗菌作用【sup】［5］【/sup】，但相