标记免疫技术新进展 - 上海交通大学医学院精品课程.pptVIP

标记免疫技术新进展 上海第二医科大学附属瑞金医院检验科 顾志冬 ACCESS全自动微粒子化学发光免疫系统 化学发光标记自动检测过程 混匀 超声波、搅拌器、震荡 取样 金属针、一次性TIP头 孵育 孵育板、孵育带 分离 磁性颗粒分离 检测 流动比色池、单管比色 O- O O OCH3 OPO3Na2 O O OCH3 O- O OCH3* 发光 Alkaline Phosphatase 发光底物在碱性磷酸酶作用下磷酸酯基发生水解，脱去一个磷酸基而得到一个中等稳定的中间体AMPD-，(半衰期2~30分钟)。此中间体分子内电子转移裂解为一分子的金刚烷酮和一分子处于激发态的间氧苯甲酸甲酯阴离子，当其回到基态时产生470nm的光，并可持续几十分钟。 AMPPD反应原理--Access非直接免疫化学发光 AMPPD特性 碱性PH环境下，非酶解性的水解很低 热稳定性好 PH9时酶解速度最快，PH9.5时信噪比最低 发光为持续型，15min达到高峰，60min内强度维持不变 相对 发光 单位 00 5 10