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不同厂家凝胶对高分子杂质定量的影响分析 摘要：比较不同厂家（百灵威与安玛西亚）Sephadex G10凝胶对β-内酰胺类抗生素高分子杂质定量的差别，分析其中的原因，选择更合适的分离工具，从而提高实验的准确性。方法：β-内酰胺类抗生素高分子杂质测定法《中国药典》（2000年版），按外标法以自身对照计算出高分子杂质的含量。结果：经上述实验，百灵威的聚合物含量明显比安玛西亚的高。结论：百灵威凝胶分离度较好，但KAV较小，易检测高分子杂质低的（一般小于0.2%）或高分子杂质分子量在1000左右的较好，而安玛西亚的则检测高分子杂质的量较高或者高分子杂质分子量较大的（2000以上）的较好。 关键词：高分子杂质 β-内酰胺类抗生素高分子杂质测定法 KAV值 一．实验原理： 分子筛机制：让药物分子自由进入凝胶颗粒内部而让高分子杂质被排阻在颗粒外部或只能部分进入较大的凝胶空隙内。葡聚糖凝胶（Sephadex G10）与溶质分子间存在的多种次极相互作用。在凝胶颗粒内部，凝胶有较大的表面积和较小的自由空间，故溶质分子在颗粒内部较颗粒外部更易和凝胶介面接触，更易产生吸附作用。上述因素使高分子杂质和药物分子在流动相的带动下 产生不同迁移速度从而得到分离。此种色谱行为可以下列公式表示： Ｋav=(Ve-V0)/(Vt-V0) Kav:分配系数； Ve：被分离物质通过色谱柱所需要的洗脱液体积，或洗脱体积； Vt：柱内凝胶颗粒占有的体积和外水体积之和，或称柱床体积； V0：柱内凝胶床中颗粒的自由空间所占的体积，或称外水体积。 Kav值越大，吸附作用越强 二．实验内容 1.1实验仪器 BP-9300-B型高分子杂质分析仪 N-2000双通道色谱工作站 电脑、打印机 2　头孢曲松钠样品　　珠海联邦制药生产 头孢曲松钠对照　中检所生产　含量： 84.1 磷酸氢二钠，磷酸二氢钠，十二烷基硫酸钠　汕头光华化工厂 实验过程 配制溶液： 1.1蓝色葡聚糖2000：精密称取蓝色葡聚糖2000　25mg置25ml容量瓶中，用纯化水溶解并稀释至刻度； 2对照的配制：精密称取对照品头孢曲松25mg，用水溶解在250ml容量瓶中，稀释至刻度； 样品的配制：精密取头孢曲松钠0.2g，置10ml容量瓶中，用水稀释至刻度。 系统适用性： 按《中国药典》（2000版）SOP装好两种不同Sephadex G10的色谱柱，先选安玛西亚填料连接高分子杂质分析仪中，做蓝色葡聚糖2000、对照溶液及供试品，记录并打印图谱。 后再换百灵威填料的色谱柱，方法同上。 注意点：为了只考擦柱子，除了色谱柱，所有的都不能换。新换的柱子必须冲流动相稳定一小时以上。 三．数据对比 批号 拖尾因子(比较) 理论塔板数(比较) 聚合物(比较) (百灵威) (安玛西亚) (百灵威) (安玛西亚) (百灵威) (安玛西亚) 305412002 1.146 1.178 1806 1534 0.22 0.19 305412057 0.22 0.19 305412063 0.22 0.18 四．数据分析 通过上面数据，拖尾因子相差不大。理论塔板数百灵威的更好，从而得出分离度较好，更适合做含少量的高分子杂质。从高分子杂质（聚合物）结果可以看出相差0.3左右，属于正常误差范围，没有特别要求时都可以用，但是做稳定性考查时一定要用同一厂家的凝胶，以免出现不下常的结果。 五．讨论： 在实验中，采用了外标法，以自身缔合物作为对照进行定