定量体积排除色谱测定高分子双水相系统的组成和分子量分布.pdfVIP

Vol. 37 No.l 高等学校化学学报 2016 年 1 月 CHEMICAL JOURNAL OF CHINESE UNIVERS lTlES 167 -173 doi: 1O.7503/cjc 定量体积排除色谱测定高分子双水相 系统的组成和分子量分布 赵梓良l 气李 琦1 ，薛彦虎l ，姬相玲l ，薄淑琴l ，刘勇刚l (1.中国科学院长春应用化学研究所，高分子物理与化学国家重点实验室，长春 13∞22; 2 中国科学院大学，北京 100049 ) 摘要 利用定量体积排除色谱研究葡聚糖-聚乙二醇双水相系统相分离后上下两相中 2 种高分子组分的含 量、分子量和分子量分布.由定量体积排除色谱法得到的两相组成(即系线端点)与用浊点滴定法得到的浊 点曲线几乎完全重合，二者仅在靠近临界点的聚乙二醇富集相有一定偏差.同时，利用体积排除色谱测得两 相中葡聚糖和聚乙二醇的分子量和分子量分布.结果表明，由系线端点得到的体系两相共存线与浊点曲线 的偏差是由于相分离过程中，不同分子量的高分子组分在两相的非均匀分配造成的.聚乙二醇分子量分布 较窄，发生相分离后，在两相的分子量和分子量分布相差不大.而葡聚糖分子量分布较宽，在相分离后两相 中的分子量和分子量分布具有较大差异，即葡聚糖组分在葡聚糖富集相中的分子量显著高于其在聚乙二醇 富集相中的分子量.随着葡聚糖·聚乙二醇体系初始浓度的增加，两相中葡聚糖的分子量差异变大.定量体 积排除色谱可以准确得到高分子双水相系统的相平衡数据及两相中2 组分的分子量和分子量分布信息，其 结果不仅为深入理解葡聚糖-聚乙二醇-水三元洛攘的相平衡提供基础，而且为双水相系统在萃取分离中的应 用提供理论指导. 关键词 体积排除色谱;双水相系统;相分离;葡聚糖;聚乙二醇 中图分类号 0631.4 文献标志码 A 当一种水恪性高分子与另一种高分子或盐的混合水溶液的浓度超过某一临界值时，会由均相榕液 自发形成互不相溶的两相体系，即双水相系统[IJ 与水·有机榕剂体系相比，由 2 种高分子(如葡聚糖 与聚乙二醇)组成的双水相系统具有温和的水环境、极低的界面张力及不破坏蛋白质的生物活性等特 性，因此被广泛用于各种生物样品(如蛋白质、酶、核酸和病毒等)的萃取分离和纯化[2J 被分离物质 在两相中的分配系数不仅取决于其本身的物理化学性质，而且与体系的相平衡密切相关.因此研究高 分子双水相系统的相分离参数，建立其与样品分离效率的关系，对于高分子双水相系统在萃取分离中 的应用具有重要的指导意义.同时也将为理解高分子-高分子，水三元溶液的相平衡提供数据基础. 浊点曲线、两相共存线、相分离临界点是描述相分离高分子溶液相图的常用参数[3 ， 4 J 对于分子量 分布较窄的高分子样品，由浊点滴定法得到的浊点曲线是体系的两相共存线的很好近似(单分散高分 子样品的浊点曲线与两相共存线重合).位于两相区的高分子混合溶液，相分离后的上下两相具有不 同的组成和密度.在元限接近相分离临界点处，两相具有非常相似的组成和密度，因此可用等体积法 来确定体系的临界点[4J 在相图上连接两相组成的直线称为系线，可以由多种方法得到.对于高分子 双水相系统，通常需要同时测定两相的2 个物理量如折光指数和旋光度[坷，利用这2 个物理量与2 种 高分子组成之间的不同线性关系推算出两相的组成.测定两相的傅里叶红外光谱或激光共聚焦拉曼光 谱，利用化学计量学方法也可得到双水相系统的组成[川，但(实验耗时较长且误差较大.最近，我们提 收稿日期: 2015 -D7 -20. 网络出版日期: 2015-10-2 1. 基金项目:国家自然科学基金(批准号: 、吉林省自然