比色法测定保健食品中胶原蛋白的探讨.pdfVIP

第35卷第3期 明胶科学与技术 V01．35．No．3 Scienceand ofGelatin 2015年9月TheTechnology Sept．2015． 比色法测定保健食品中胶原蛋白的探讨 韩瑞超+ 青岛中仁保健品科技有限公司研发中心，山东青岛，266300 摘要：目的建立保健食品中胶原蛋白的测定 维持肌肤良好的弹性，强化肌肤的韧性，延缓 方法。 肌体的衰老【3qJ。同时胶原蛋白还具有促进 方法样品经硫酸溶液水解释放单体羟 钙的吸收、降低血甘油三酯和胆固醇的生理作 脯氨酸，经氯胺T氧化后与二甲氨基苯甲醛在 用。因此胶原蛋白在保健食品领域具有广阔 一定温度下反应生产红色化合物，在波长 的前景，准确测定胶原蛋白的含量对于合理膳 558nm处有最大吸收，测定其吸光度与标准比食、保健防病具有重要意义。 较定量，羟脯氨酸的含量再乘以相应的换算系 目前胶原蛋白的测定方法没有相关标准， 数来得到保健食品中胶原蛋白的含量。 但是胶原蛋白中其特征性成分羟脯氨酸的含 结果标准曲线线性良好，相关系数r=量较高，且其他蛋白中不含羟脯氨酸，利用这 0．9939，检出限为108．5ug／g。相对标准偏差一性质我们可以通过测定羟脯氨酸的含量再 在2．96％一7．73％，回收率在90．0％一94．9％。乘以相应的换算系数来得到保健食品中胶原 结论比色法重现性好、准确度高，能满 蛋白的含量。其原理是试样经酸液水解后释 足保健食品中胶原蛋白的定量检测。 放的羟脯氨酸单体经氯胺T氧化后与二甲氨 基苯甲醛反应生产红色化合物，在波长558nm 关键词：比色法；胶原蛋白；羟脯氨酸；测定；保 处有最大吸收，测定其吸光度与标准比较定 健食品 量MJ，羟脯氨酸的含量乘以换算系数得到胶原 蛋白的含量。 1 前言 2实验器材 胶原蛋白广泛存在于动物体结缔组织、皮 2．1仪器 肤、软骨中，是一类极其重要的结构蛋白，占哺 紫外可见分光光度计：752N，上海精密科 乳动物体内蛋白质总量的25％～30％，发挥着 学仪器有限公司；电热恒温鼓风干燥箱：DHG． 保护机体、支撑器官的重要作用。胶原蛋白分 9240A型，上海一恒科技有限公司；电热恒温 子具有独特的3股超螺旋结构，即3条多肽链水槽：DK一8D型，上海跃进医疗器械厂 的每条都向左形成左手螺旋，3条这种肽链再 2．2材料及制备方法 以氢键相互咬合形成牢固的右手超螺旋¨J。 2．2．1硫酸溶液[c(H2S043mol／L)]：边搅 这种独特的三重螺旋结构，使其分子结构非常 稳定，并且具有低免疫原性和良好的生物相容 到lL纯化水中，冷却至室温后定容2000ml。 性等旧J。经常食用含胶原蛋白丰富的食品，能 有效地增加皮肤组织细胞的储水能力，增强和 浓盐酸(36％)稀释定容至1000ml。 十E—mail：503794536@qq．com 第35卷第3期 韩瑞超：比色法测定保健食品中胶原蛋白的探讨 ·149· 2．2．3缓冲溶液(pH=6．8)：称取26．Og一水 柠檬酸(C6H807·H：0)、14．Og氢氧化钠40ug／ml。 向水解管中分别加入2．0ml氯胺T，摇匀 (NaOH)、78．09无水乙酸钠，溶解于500ml纯 化水中，冷却至室温后加入250ml正丙醇，用后室温下静置20分钟，再分别加入2．0ml显 水定容至2L，存