谈有关HPLC柱效的问题.pdfVIP

《海南医学2∞2年第13卷第3期 谈有关HPLC柱效的问题 海南省药品检验所(海口570102)赖俊雄届咄 B 摘要目的：丹析影响HI112拄效的若干主耍固亲，方击：列举典型例子分析说明宴赠时导致柱效变化之因 素。结果：证明柱类型、柱填充、PH值、缓冲{斑种类厦浓度、温度、流动相等因素对柱效的影响。结论：拄类型、柱填 充即内在塔板数是柱效的内在先央因幕；分析条件与方法即方法塔挺敦是柱螋的外在影响周毫。应尽可能使方法 塔板数接近内在塔板散。 关键词眦￡拄效捌紊 内在塔板散方法塔板教 ^Bo【丌rilet30LUMNErHa匝NCrOFltPLC ／A／血z女wHak,a,n魄∞m《_】}Lj女“《Ha／Kou570102) affectthe∞hⅢm Abntlld：Obje,iive：To自b唑-椰淝key胁omthete栉cleacy村HPlc．Men埘：C．itee／picd吼皿Ipleto 曲删ethe函蝴岫”7yi唯the∞hmle描clencyof}Ⅱ’∽．Rem／ts：To出r蜊劬止ethe枷jcbdsuch丘咖m_typed∞f- and and u皿，严矗嵋e0f∞lL啪．PH，type liqIIid the咖111匝e函ienc?Omduskm： conce咖tion缸叫k，IP|“p哪hⅡPE。b口*to internal mln^,erbthei吐町t“factor the 啊*cd-cnItmm．F。ck。铲0f呻lIl皿ie．山eplates of∞lunm幽商m吁}methodadopled．ie ntl山ristheeawnmlfactarof He日艚toTⅡⅡkethe酬州n‰r,umh盯¨d黜btheinternal 毗叫plstes o■一eⅢqcie珊y n岫mmb日*possible 14PLcIjdnm血【盯rl丑l KeyⅥⅡ出一u曲蚰口∞叮of plates口L曲盯m砌n|一m糟number 在HPLC的分折检测中，柱效是一个由分子与键台相相互结合保留于柱上而 量；样品溶剂；各相的扩散速度；机械性 重要因素，它直接影响到混合组分的分 没有进一步的化学反应，是在非常小的 因素如死体积及填充的颗粒均匀度等； 离技能：在众多对柱效的影响因素中，有 载样条件下及等温曲线的线性区阗测定 以及数值计算因素，如计算塔板敬采用 ～些是经常遇到的，但又是经常忽略的。 的，尤为关键的是铡定内柱效应该在证 的方法。内柱效改变后所测定的柱效是 奉文将对此作一番探讨。 实柱已被填充的非常有效情形下进行。 实际柱效，其表现形式便是方{击塔板数。 当我们作f皿c检验时，采用新柱，就掌一支典型的反相拄来说，它的内在 现就以上提到的影响柱效诸因素中 且新柱标示柱教较高，但时常发现实测 塔板数测定应采用低浓度小分子的碳氢 选取其中较具代表性的因素举铸说明如 桂效远较标示拄效低。这一现象从理论 化合物样品如二甲苯，流动相应含多量 下。附图1所示“’，在此侧中为两支0 上解释，可以说一支新柱并非只具有单 的有机溶刺，如已腈(其粘度极低)，在低反相柱，均在PH7环境中使用，在125天 纯内柱效。若说柱子不具有固定的塔板 扩散性呲上测试。用这种方法溅得 使用期间柱教均有所降低，其中一支在 数或许让人感到疑惑，但这也正是操作 的内在塔板数能反映柱填克的好坏。然 的磷酸盐缓冲液环境中使用．碱性分子 者需作探^分析与了解之处，而非仅仅而实际上大多数人使用极性分子样品， 的保留时闻增加了5