偶氮还原酶AZR的结构和其K109的定点突变研究.docVIP

偶氮还原酶AZR的结构及其K109的定点突变研究 柳广飞* 周集体 周 觅 李敬美 (大连理工大学环境与生命学院 大连 116023) 摘 要: 利用同源建模构建了Rhodobacter sphaeroides的偶氮还原酶AZR的三级结构模型, AZR为一种???型结构的黄素氧化还原蛋白。两类依赖黄素的偶氮还原酶的三级结构对比表明它们具有高度的相似性。在序列和结构对齐分析的基础上, 选择保守位点K109进行K109A和K109H的定点突变研究。突变后K109H的最适pH=6, 而K109A的最适pH=9。突变未改变AZR的最适温度(0℃)。第109位正电荷残基对甲基红的结合有重要影响; 而K109H对NADPH的结合并非保守突变。K109可能只参与对NADPH的2’-磷酸基团的结合, 而对NADH的结合无影响。Site-directed Mutagenesis of Its K109 Residue LIU Guang-Fei* ZHOU Ji-Ti ZHOU Mi LI Jing-Mei (Institute of Environmental and Biological Science and Technology, Dalian University of Technology, Dalian 116023) Abstract: Three-dimen