用HPLC法测定参维冻干蜂王浆片中维生素B1和维生素B2含量.pdfVIP

用HPLC法测定参维冻干蜂王浆片中 维生素B1和维生素B2含量 北京市药品检验所(100035) 佟艳华 张醅 上海新亚药业闵行有限公司(200245) 杨军 摘要 目的 建立参维冻干峰王浆 关键词 高效液相色谱法 参维冻 1．3线性关系试验 片中维生素B。和维生素B 的含量测定 干蜂王浆片 含量测定 1．3．1精密称取维生素 B。对照品 方法。方法 用KANTO CHEMICAL Co．， 80mg，置 100ml量瓶中，加醋酸溶液 1。方法与结果 Inc，Mightysil C18色谱柱 (250x4．6 mm， 20ml，水浴加热15分钟使溶解，冷却，加 5tzm)，以乙腈一0．032％的辛烷基磺酸钠 1．1色谱条件 上述溶剂稀释至刻度，摇匀，作为储备 溶液(取辛烷基磺酸钠0．32g，加冰醋酸 色 谱 柱 ：KANTO CHEMICAL Co．， 液，精密量取储备液1．0ml、2．0ml、3．0ml、 3ml和三乙胺3ml，加水溶解至 1000m1) Inc，Mightysi|一Cl8色谱柱 (4．6 x250mm， 4．0ml、5．0ml、6．0ml、10．0ml、15．0ml，分别置 (10：90)为流动相，流速 1．0ml·min～，检 51xm)；流动相：以乙腈一0．032％的辛烷基 50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作 测波长为270nm，柱温为35℃。结果 维 磺酸钠溶液 (取辛烷基磺酸钠0．32g，加 为供试液，进行HPLC分析，结果维生素 生素 B。的线性范围为 16tzg·ml～一 冰醋酸3ml和三乙胺 3ml，加水溶解至 Bl在16tzg·ml ~8001xg·ml 范围内，其峰 800~g·ml (r=0．9999)，平均回收率为 1000m1)(10：90)；流速：1．0ml·min ；检测 面积A对浓度C显线性关系，回归方程 99．4％，RSD=0．9％(n=9)；维生素B2的线 波长：270nm；柱温为35℃。 为y=1289lx+59048(r=0．9999)。 性范围为 21xg·ml ~104tzg·ml (r= 1．2阴性样品溶液的制备 1．3．2精密称取维生素 B：对照品 1．0000)，平均回收率为99．6％，RSD= 按处方比例称取全方，(分别不含维 10mg，置 100ml量瓶中，加醋酸溶液 0．7％(n=9)。结论 HPLC法适用于参维 生素B 和维生素B )，照1．8项下供试品 20ml，水浴加热15分钟使溶解，冷却，加 冻干蜂王浆片中维生素B。和维生素B 溶液方法制备阴性样品溶液，结果：其他 上述溶剂稀释至刻度，摇匀，作为储备 的含量测定。 成分对分析不产生干扰。 液，精密量取储备液1．0ml、2．0ml、3．0ml、 峰面积，RSD：0．83％，牛蒡苷峰面积， 均加样回收率为99．94％，RSD=I．80％。 发现在228nm检测，保留时间比205nm RSD=0．52％。表明供试品溶液在 12小时 2．8样品的测定 短，22分钟后已无波峰出现，两峰灵敏度 内稳定。 分别精密吸取对照品溶液及供试品 高于在280nm的检测。所以采用228nm 2．6重复性试验 溶液各10ul，按上述色谱条件测定，以外 作为检测波长。 取同一批号(6121516)样品6份，每 标法计算样品中连翘苷和牛蒡苷的含 3_3流动相的选择 份约1．6g，按供试品溶液制备方法制备， 量，结果见附表。 采用《中国药典}2005年版一部中羚 测定连翘苷和牛蒡苷的含