福辛普利对胞外调节蛋白激酶在糖尿病肾病中表达的影响及其作用机制.pdfVIP

塞坦医堂 查一 l第一 鲞堑24 甥 3841 福辛普利对胞外调节蛋白激酶在糖尿病肾病中 表达的影响及其作用机制 关 欣 郑红光 摘 要 目的：观察福辛普利对糖尿病肾病(DN)大鼠肾皮质中磷酸化胞外调节蛋白激酶1／2(p-ERK1／2)、转 化生长因子一B (TGF—p，)基因的表达及肾脏病理变化的影响。探讨福辛普利对DN肾脏的保护作用机制。方法：雄 性wistar大鼠33只，随机取 10只为对照组(A组)，其余大鼠高糖高脂饲料喂养1个月后，腹腔注射链脲佐茵素建 立早期DN模型，将大鼠分为模型组(B组)、福辛普利组(c组)。c组在成模后2周开始给药福辛普利10 g／(kg·d) 灌胃：A组及B组灌服相应容量(10 mL／kg)的生理盐水，1次／d，连续6周。检测血糖、肾小球滤过率、尿微量白蛋 白、肾肥大指数，用Western blot方法检测肾皮质p-ERK1／2；用RT—PCR技术检测TGF—p1基因的表达。结果：治疗 后6周B组和C组血糖值均明显高于A组 C组血糖值与B组之间未见明显差异。治疗6周B组和C组尿微量 白蛋白、肾小球滤过率、肾肥大指数和肾小球系膜细胞基质相对面积均明显高于A组(均P0，01)。治疗后上述 指标C组低于B组(均P0，01)。C组肾皮质p-ERK1／2、TGF．pl基因的表达均明显低于B组，肾组织病变明显减 轻。结论：(1)p-ERK参与了DN的发生与发展。(2)福辛普利抑制DN大鼠肾皮质中ERK的活性，并下调TGF．p1 基因的过度表达．减轻肾组织病理改变。(3)福辛普利对DN肾脏的保护作用，可能与抑制ERK活性有关。(4)ERK 活化与DN高血糖、肾小球高滤过、TGF B 基因的过度表达有关。 关键词 糖尿病肾病 模型，动物 中药复方 磷酸化胞外调节蛋白激酶1／2 肾皮质转化生长因子一p 糖尿病肾病(DN)早期表现为肾小球滤过率升高 23只给予高糖高脂饲料，喂养1个月后造模。造模前 和微量蛋白尿，病理形态学以肾脏肥大和系膜细胞基 禁食12 h，然后以50 mg／kg链脲佐菌素1次腹腔注 质(ECM)增多为特点。DN的发病是由糖脂代谢紊乱、 射。72 h后大鼠眼眶采血测定空腹血糖，造模过程中 细胞因子、生长因子等多种因素综合作用的结果_l_ 。 死亡1只。血糖值大于16．7 mmol／L的22只。列入观 其中很重要的一个机制是激活细胞中的胞外调节蛋 察对象。按血糖值将大鼠分为模型组(B组)与福辛普 白激酶(ERK)信号传导通路。最近研究发现ERK的 利组 (C组)，每组11只。c组给予福辛普利 10 g／ 激活与人类肾小球疾病的细胞增殖、组织损伤、肾功 (kg·d)灌胃(1 mL／100 g体重)；A组及B组灌服相应 能紊乱及DN的发生与发展有密切关系[341。本实验观 容量(10 mL／kg体重)的生理盐水，各组每天灌胃1 察磷酸化 ERK1／2(p-ERK1／2)在DN肾皮质中的表 次，连续6周。实验期间自由饮水，未使用胰岛素和 达，探讨其在DN发病中的作用及福辛普利对P— 其他降糖药。 ERK1／2的影响。 1．2．2 标本收集与处理 大鼠处死前1 d，用代谢笼 1 材料与方法 收集24 h尿，处死前测生化指标．处死后常规切片行 1．1 材料 Wistar大鼠33只，雄性，体质量(200± HE染色，每张切片在20倍物镜下取20个完整肾小 20)g，由沈阳军区总医院实验动物中心提供。动物 球。测肾小球面积和系膜基质面积，并计算出肾小球 使用许可证：SYXK(军2002—019)试剂：福辛普利 基质面积和肾小球面积比值．即为肾小球ECM相对 (fosinopril)片，国药准字 H1998019，产品批号 面积。 0502087。由中美上海施贵宝有限公司提供，规格 10