精原干细胞研究进展.pdfVIP

2007筇 熬43拣 第23 Review Papers· 精原干细胞研究进展 薛振华，5l《国世 ，王永彬，田见晖，曾申明 (中国农业大学动物科技学院，农业生物技术国家重点实验室，北京 100094) 摘 要：精原干细胞位于雄性哺乳动物的曲细精管生精上皮基膜内侧，是一群具有高度自我更新能力和分化潜能的 细胞．它能向子代传递遗传信息，在哺乳动物中一般是指未分化的A型精原细胞。在精子发生这一特殊的细胞分化 过程中，精原干细胞的地位极其重要，它既具有自我更新生成新的干细胞能力，又能够不断的增殖分化形成各阶段 的生殖细胞，并最终分化产生精子，承载起向下一代传递遗传信息的使命。精原干细胞凭借其特有的生物学特性，在 医学、畜牧业生产等领域都有着广阔应用前景。本文就精原干细胞的生物学特征、分离纯化、培养和移植技术等研究 概况作简要概述。 关键词：精原干细胞；纯化；综述；培养；移植 中图分类号：S 814，1；Q 25 文献标识码：A 文章编号：0258—7033(2007)23—0041-04 质，后来的研究中又发现了异染色质含量处于两者之 1 精原干细胞的生物学特征 间的In型精原细胞。根据曲细精管基膜上局部排列特 精原干细胞(spermatogonial stem cel1)起源于胚胎外 征，又可将A型精原细胞分为A—single(As)，A—paired 胚层细胞，并由尿囊基沿后肠迁移到生殖嵴的原始生 (Apr)和A—aligned(Aa1)。一般认为As细胞是精子发生 殖细胞分化产生，位于哺乳动物睾丸曲细精管的生精 过程中的干细胞，在曲精细管的微环境内，它既可以自 上皮基膜内侧。精原干细胞较睾丸体细胞体积大，呈圆 我更新生成新的干细胞，又可以定向分化形成Apr细 形或椭圆形。电镜下，可见精原干细胞镶嵌在支持细胞 胞，Apr细胞由细胞问桥连接，进一步分裂形成4、8个 的侧面，核内常染色质占绝对优势，异染色质很少，核 或16个Aal细胞，Aal细胞再分化形成A1、A2、A3、A4 仁呈网状，问或有空泡，胞质中核糖体、线粒体含量较 和In型细胞，然后再分化为B型细胞，B型细胞经过 为丰富，其他细胞器不发达。精原干细胞之间以细胞问 数次分裂后，分化为初级精母细胞，经过减数分裂过程 桥相连接，即胞质分裂不完全。小鼠及人的精原干细胞 后最终形成精子。 直径约10～12 m，猪的直径约为20～25 m，生长状态 2 精原干细胞的分离和纯化 良好时，细胞透明，颗粒较少，核不明显，除单个细胞存 在外，常见有2个或多个精原干细胞一起存在lll。HE 据估计，睾丸中的精原干细胞与全部生殖细胞的 染色，精原细胞呈圆形，细胞膜多数光滑，少数细胞的 比例约为2～3：10 000，而且随着出生后时间的延长，精 胞膜外存在一些由胞质形成的小突起，圆形的核占整 原干细胞分化形成各级生精细胞，其数量及所占比例 个细胞的90％以上，核内染色质呈强嗜碱性，染成深蓝 都会越来越少，这样就使得分离纯化相对较为困难，故 或蓝紫色，胞质弱嗜碱性，染成淡蓝色；而睾丸体细胞 研究中应该选择出生天数较少的动物。一般情况下，小 的核大多数都呈弱嗜碱性，染成淡蓝色，胞质中有大小 鼠宜选用6～8日龄的，大鼠宜选用9～10日龄的，兔宜 不一的空泡状结构。 选用3～5月龄的，狗宜选用 1～5岁的嘲、牛宜选用5～7 较早的研究中将精原细胞分为A、B类型。A型细