铽-环丙沙星稀土敏化荧光猝灭法测定叶酸.pdfVIP

第35卷 分析化学(FENⅪHUAXUE)研究简报 第7期 Chinese 2007年7月 JoumalofAn8l”icalChemistry 1067一1070 铽一环丙沙星稀土敏化荧光猝灭法测定叶酸 刘保生‘ 王云科 张彦青 吕运开 (河北大学理化分析中心，河北省分析科学技术重点实验室，保定071002) 摘要在pH：5．O的醋酸-醋酸钠缓冲溶液中，铽∞与环丙沙星反应形成l：2的稳定络合物，其最佳激发、 发射波长分别为A。。=330nm、A。=545nm。在该反应体系中加入适量叶酸溶液，铽锄与环丙沙星络合物的 激发、发射波长位置不变，但荧光强度下降。利用这一现象，建立了简单、快速、灵敏的测定叶酸的荧光分析方 法。该方法保持了叶酸结构的完整性，叶酸浓度在22—880彬L范围内符合线性关系；方法检出限为 7．8斗g／L。用于片剂及胶囊中叶酸含量的测定，结果满意。6次平行测定该方法回收率为93．7％～107．9％， 相对标准偏差为0．38％一2．8％。 关键词叶酸，铽，环丙沙星，荧光猝灭 1 引 言 叶酸属于B族维生素，又称维生素B¨或维生素Bc。是维持生物体正常生命过程所必需的一类有 机物质。叶酸的分析方法主要有微生物法[1 J、高 J、紫外分光光度法【2J、荧光分析法【3。J、气相色谱法M 效液相色谱法。刊等。叶酸具有吡嗪一嘧啶环，具有特殊的吸收光谱及氧化还原特性，在接受紫外光照射 后可转变成最大激发、发射波长分别为274nm、466nm的强蓝色荧光化合物。现有荧光测定方法通过 紫外光照射或使用强氧化剂KMnO。、H：O：等将叶酸氧化分解，利用其分解产物的荧光，进行含量测定， 操作繁杂、费时，且由于叶酸分解不完全等造成测定方法的重现性较差。紫外光谱法选择在280砌处 进行测定，干扰较多。将叶酸分子作为一个整体进行荧光分析的方法，尚未见报道。本实验利用铽与环 丙沙星反应产生“稀土敏化荧光”铽的特征发射峰，叶酸的加人能够猝灭铽与环丙沙星反应体系在 545 nm处的荧光，据此建立了在不破坏叶酸分子结构的基础上，用荧光分析法测定叶酸的新方法。 2 实验部分 2．1仪器与试剂 可见分光光度计(日本岛津)；pHs一3c型酸度计(上海雷磁分析仪器厂)。 叶酸(PGA)标准溶液：准确称取0．2353g叶酸(天津市华东试剂厂)，加几滴Na0H稀溶液溶解，加 水定容于100mL棕色容量瓶中，配成1．OmmoL／L溶液，用时稀释到所需浓度。环丙沙星(CPFx)溶液： 准确称取一定量的cPⅨ标准品(中国药品生物制品检定所，纯度99．0％)溶于蒸馏水中，配成 3．0 mL mmoL／L水溶液，用时适当稀释；％c13水溶液：准确称取2．2431g％407(纯度99．0％)，于100 烧杯中，加入少量Hcl(1：1)，并加几滴H：O：，加热使其溶解，待蒸发近干，自然冷却至结晶析出，用蒸馏 水溶解，转至100mL容量瓶中定容；n¨浓度为O．12 m彬L moL／L HAc和0．1 NaAc溶液 用时稀释。醋酸-醋酸钠(HAc·NaAc)缓冲溶液(pH=5．O)：由0．1 在pH计上调节得到。所用试剂均为分析纯，实验用水为二次蒸馏水。 2．2实验方法 mL3．0×10一moL／L mL1．2x 于10mL比色管中依次加入2．0 CPFX溶液，O．5 10一moL／L％3+溶 mL 5．0 液，1．0 pH HAc．NaAc缓冲溶液，不同量1．0×10—moL／LPGA溶液。摇匀，用蒸馏水定容，放置 2006-1