类风湿关节炎关节滑膜细胞中IL-18表达及意义.pdfVIP

山东医药2008年第48卷第48期 类风湿关节炎关节滑膜细胞中 IL一18表达及意义 曲 瑾 (天津市第一中心医院，天津300191) [摘要] 取类风湿关节炎(RA)患者的关节滑膜4JD份 (RA组)及外伤后患者的关节滑膜40份(对照组)，用 胶原酶消化培养法培养至3—8代，用免疫组化法检测滑膜细胞 IL-18表达，用酶联免疫吸附检测细胞培养上清液 中IL．18水平。结果 RA组滑膜细胞及上清液中IL．18分泌量明显高与对照组(P0．05)。认为IL一18高表达参与 RA发病，可作为临床治疗的靶点之一。 [关键词] 类风湿关节炎；白细胞介素一18；滑膜细胞 [中图分类号】 R593．22 [文献标识码】 B [文章编号] 1002—266X(2008)48-0099-02 类风湿关节炎 (RA)是一种慢性 自身免疫性疾 强阳性(+++)。②滑膜细胞培养上清液：采用 病，病理生理过程包括炎症、自身免疫、滑膜组织增 ELISA法。滑膜细胞以1×10／ml密度接种于培养 生，表现为滑膜细胞增殖、炎性细胞浸润、血管翳形 板，培养72h，将滑膜细胞分为3组，分别予LPS30 成以及滑膜细胞分泌多种促炎细胞因子。IL一18是 ml、LPS30 g／ml+LEF30p~g／ml、1％FBS。每 IL一1家族 的促炎细胞因子。2005年 3月 ～2006年 lO孔细胞为一组，继续培养 48h，提取上清液。参 l2月，我们观察了RA患者关节滑膜细胞 IL—l8表 照试剂盒说明书操作。 达水平 ，现探讨其临床意义。 1．2．3 统计学处理 采用 SPSS12．0统计软件。计 1 材料与方法 量资料用 ±s表示，组间比较选用单因素方差分析 1．1 材料 关节滑膜标本 80份，取 自我院及天津 及LSD法；计数资料选用非参数检验。检验水准 医院膝、髋关节置换术患者。其中RA患者关节滑 = 0．05。 膜4O份(RA组)，外伤后患者关节滑膜 40份(对照 2 结果 组)。RA诊断符合美国风湿病学会 (ACR)1987年 RA组滑膜细胞 IL一18阳性率为 87．5％ (35／ 修订的分类标准。实验用其他材料包括：Ⅱ型胶原 40)，对照组为75．O％(30／40)，两组阳性率比较，P 酶、脂多糖 L2880．055：B5，胎牛血清(FBS)、胰蛋白 0．05。两组滑膜细胞培养上清液 IL一18水平见表 酶，D—MEM培养基，HistostainTM—PlusKits免疫组化 1。 试剂盒，人细胞培养上清液 II一18ELISA试剂盒。 表 1 两组细胞培养上清液 一l8水平 (pg／nfl，i±) 脂多糖 (LPS)，来氟米特(LEF)。 1．2 方法 · 1．2．i 滑膜细胞的培养与传代 两组均将关节滑 注 ：与对照组 比较 ，PO．05，P0．O1；与 PBS比较 ，。P0．05 膜组织剔除脂肪、血管组织，清洗后剪碎 ，加人 Ⅱ型 3 讨论 胶原酶，反复吹打均匀消化，加入胰酶一EDTA消化， IL一18是近年来研究发现的一种新型 IL家族促 150目金属滤网过滤，加入 10％进 口FBS混悬细胞 炎细胞因子，与 IL—l8受体或其结合蛋 白结合发挥 培养，24h后更换培养液，继续培养，取3～8代细胞 生物学效应。Pay等报道…，IL．18能促进T细胞增 进行相关指标检测 。 殖，增强NK细胞的细胞毒作用，诱导以Thl细胞为 1．2．2 IL。18含量检测 ①细胞质 内：用滑膜细胞 主的细胞免疫反应，使病变组织 Th1／Th2比例失 悬液进行爬片，待细胞基本汇合后 100％冷丙酮固 衡。Petrovic—Rackov等报道口J，IL—l8还可促进 IFN一 定，分别加入一抗 、二抗