2016内蒙古职校乳品分析与检验教案：项目八 微生物的基础知识及基本技能.docVIP

项目八 微生物的基础知识及基本技能 学习任务： 1.学习微生物的基础知识? 2.学习玻璃器皿的包扎和灭菌 3.学习配制培养基。 4.学习微生物的接种、分离、计数等基本技能 任务要求： 1.掌握微生的基础知识。 2.掌握玻璃器皿的包扎和灭菌 3.掌握培养基的制备。 4.掌握微生物的接种、分离、计数等基本技能 所需掌握知识点： 一、接种 1.常用的接种工具 常用的有接种针、接种环、接种钩、玻璃涂棒等。 (1)?接种针??长为8cm，呈直线状，固定在长约20cm的金属柄上，多用于穿刺接种。 (2)?接种环???在接种针的前端，用镊子卷成一直径为2mm的密封圆圈，并 使圆环平面与金属柄之间弯成160°～l70°角，常用于斜面和平板等的接种。 (3)?接种钩??取一较粗、较硬的针丝，将其前端弯成一个约3mm长的直角。 多用于霉菌和放线菌的接种。 (4)?涂布棒??用直径3～4mrn，长20crn的玻璃棒，在火焰上将其前端弯成边 长约为3cm的等边三角形，再将该三角形平面与柄之间弯成l40°角，涂布器多用于涂布平板进行菌种分离或活菌计数用。 ? 2.接种方法 将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种。常用的接种方法有以下几种：1)?划线接种这是最常用的接种方法。即在固体培养基表面作来回直线形的移动，就可达到接种的作用。常用的接种工具有接种环，接种针等。在斜面接种和平板划线中就常用此法。2)?三点接种在研究霉菌形态时常用此法。此法即把少量的微生物接种在平板表面上，成等边三角形的三点，让它各自独立形成菌落后，来观察、研究它们的形态。除三点外，也有一点或多点进行接种的。3)?穿刺接种在保藏厌氧菌种或研究微生物的动力时常采用此法。做穿刺接种时，用的接种工具是接种针。用的培养基一般是半固体培养基。它的做法是：4)?涂布接种与浇混接种略有不同，就是先倒好平板，让其凝固，，就可长出单个的微生物的菌落。5)?液体接种从固体培养基中将菌洗下，倒入液体培养基中，或者从液体培养物中，用移液管将菌液接至液体培养基中，或从液体培养物中将菌液移至固体培养基中，都可称为液体接种。6)?注射接种该法是用注射的方法将待接的微生物转接至活的生物体内，如人或其它动物中，常见的疫苗预防接种，就是用注射接种，接入人体，来预防某些疾病。 (二)???稀释分离法 1.?取盛有无菌水的试管若干支（9毫升/支)，分别记1、2、3…….。用无 菌吸管取1mL样品悬浮液(或增殖液)?注人一号管内、用吸管吹吸三次混匀，记为10-1，然后从一号管内取1mL于二号管内，通过吸管的吹吸混合均匀，记为10-2。同样从二号管内取出1mL于三号管内，即为?10-3。以此类推。 2.?用三支无菌吸管分别吸取后三个稀释度的稀释液各1mL于三个无菌 培养皿中，然后加人融化后冷却至45~50℃的固体培养基12~15mL，迅速摇匀，待凝固后，倒置于保温箱中培养，挑选单个菌落移接于斜面培养基上培养，如图4-2-3所示。 (三)?涂布分离法 取一滴样品稀释液于平板培养基上、用无菌玻璃涂布器，将样品在琼脂培养基表面均匀涂布，使其形成单个菌落。其操作方法如下。 1.?融化固体培养基倒平板数个。 2.?将待分离的样品适当稀释。 3.?用无菌吸管取稀释液0.1?~0.2mL于培养基平板上，立即用无菌玻璃刮刀依次涂布2~3个平板。然后倒置培养，将单个菌落转人斜面培养基培养。 三、培养微生物的生长，除了受本身的遗传特性决定外，还受到许多外界因素的影响，如营养物浓度、温度、水分、氧气、pH等。不同的微生物培养在固体、液体或半固体培养基中，微生物自身的群体形态和它的生长繁殖情况都不一样，表现出一定的培养特征和生长规律，了解它们的培养特征和生长繁殖规律，对识别和控制利用微生物具有重要价值。微生物的种类不同，培养的方式和条件也不尽相同。按照微生物对氧气的需要情况，可分为以下类型根据培养基的物理状态，可分为固体培养和液体培养两大类。1)?固体培养：是将菌种接至疏松而富有营养的固体培养基中，在合适的条件下进行微生物培养的方法。2)?液体培养：在实验中，通过液体培养可以使微生物迅速繁殖，获得大量的培养物，在一定条件下，还是微生物选择增菌的有效方法。 2