树鼩cd4 全长编码序列的克隆及分子特征分析.pdf

动 物 学 研 究 2012，Feb. 33(1): 60−66 CN 53-1040/Q ISSN 0254-5853 Zoological Research DOI ：10.3724/SP.J.1141.2012.01060 树鼩 CD4 全长编码序列的克隆及分子特征分析 1,2,3 4,5 3 4,5 1 2,* 3,* 田巍威 , 高跃东 , 郭 彦 , 黄京飞 , 肖 昌 , 李作生 , 张华堂 (1. 西南大学 生物技术学院, 重庆 北碚 400715; 2. 云南沃森生物技术股份有限公司, 云南 昆明 650106; 3. 中国科学院昆明动物研究所 动物模型与人类疾病机理重点实验室; 免疫生物学实验室, 云南 昆明 650223; 4. 中国科学院昆明生物多样性大型仪器区域中心, 云南 昆明 650223; 5. 中国科学院昆明动物研究所 遗传资源与进化国家重点实验室, 云南 昆明 650223) 摘要：树鼩作为多种人类疾病研究模型的可能性已受到广泛关注, 但尚缺乏研究其免疫功能的基本标志以及 单克隆抗体。该实验首先以树鼩外周血总 RNA 为材料, 通过 RT-PCR 扩增得到长度为 1 365 bp 的树鼩CD4 全长 编码序列, 并确定了数据库中缺失的两个片段, 进而通过 Clustal W 等软件对其序列和分子特征进行分析, 发现树 鼩 CD4 氨基酸序列胞外和胞内域保守性较好，且与人类和猴的亲缘关系较近。虽然树鼩和人 CD4 分子表面大部 分区域均带正电荷, 但与人 CD4 胞外域 D1 相比, 树鼩 CD4 D1 结构区域表面带负电荷较多, 且多出两个 N-糖基 化位点。这些差异对抗体的结合可能存在影响。该研究为今后树鼩 CD4 单克隆抗体制备及功能研究奠定了基础。 关键词：树鼩; CD4 分子; RT-PCR; 结构; 功能; 单克隆抗体 中图分类号：Q959.832; Q951.3; Q347 文献标志码：A 文章编号：0254-5853-(2012)01-0060-07 Cloning of full-length coding sequence of tree shrew CD4 and prediction of its molecular characteristics 1,2,3 4,5 3 4,5 TIAN Wei-Wei , GAO Yue-Dong , GUO Yan , HUANG Jing-Fei , 1 2,* 3,* XIAO Chang , LI Zuo-Sheng , ZHANG Hua