重复超排对育成牛繁殖力影响的研究 - 北京安伯胚胎生物技术中心.doc

重复超排对育成牛繁殖力影响的研究 冯春涛1，李树静*1，21，(Superovulation)仍是胚胎移植的主要胚胎来源。重复超数排卵简称“重复超排”，已经成为一项提高供体奶牛利用率的手段，研究表明重复超排能够提高同一供体所获胚胎数量，提高良种奶牛的利用率[1]，而提高供体奶牛利用率的主要方法是缩短重复超排间隔[2]。2005年，代苏伟[3]报道超排对泌乳牛产奶量和繁殖性能均无显著影响。对育成牛经高强的重复超排生产胚胎后，其利用方式主要为自然发情后配种或作为受体移植，但对重复超排后奶牛的人工授精及胚胎移植效果是否会受影响，少见相关报道。因此本文对重复超排后的奶牛进行人工授精配种和作为受体进行胚胎移植，分析了重复超排后恢复时间和超排次数对奶牛妊娠率的影响。 1 材料与方法： 1.1 实验动物及主要试剂 实验动物：奶牛为石家庄天泉良种奶牛有限公司提供的14～16月龄荷斯坦育成牛，于2007年1月～2007年6月间重复超排1～6次不等，两次超排间隔10天左右，供体牛健康，无生殖道和传染性疾病，营养状况较好。每次超排后根据超排结果对供体牛进行选择，超排效果好（即排卵总数大于10个或可用胚数大于5个）的供体牛继续用于超排，效果不好的供体牛做为受体进行同期发情处理用于胚胎移植或自然发情后人工授精。 实验试剂：促卵泡素FOLLTROPIN-V：加拿大Vetrepharm Canada Inc；维生素ADE注射液：中国农业科学院畜牧研究所；氯前列腺烯醇PG2α:每支0.3mg/2ml 中国农业科学院畜牧研究所；雌激素Estrumate:加拿大 Schering Canada Inc；孕酮栓CIDR:新西兰 Pharmacia Limited Company。 1.2 奶牛重复超排处理 在发情周期的任一天上午8:00～μg每头，12小时后进行第二次配种。第17天对供体牛进行冲胚，性别鉴定。相邻两次超排之间间隔为10天左右。 供体冲胚采用非手术法进行。保定好供体牛后，进行麻醉，采用尾椎硬膜外麻醉的方法，待尾部松弛后进行冲胚，根据供体牛子宫颈的情况进行选择冲胚管的型号，冲胚结束后注射土霉素针剂。操作过程注意卫生，防止感染及硬性损伤发生。 1.3 人工授精 供体奶牛超排处理1～3次后如果超排效果不理想，自然发情牛则进行人工授精。人工授精方法：采用常规冻精，发情后12h第一输精，24h第二次输精，每次1支。 1.4 奶牛同期发情处理 超排处理后对供体牛进行同期化处理，首先对已超排1～6次不等，营养状况良好的荷斯坦牛进行直肠触检，检查卵巢是否处于活动状态，子宫及生殖道是否有炎症等。同期发情处理方法：CIDR-PG法，在发情周期的任意一天放入CIDR，在放CIDR后第7～9天注射PG 0.4mg/头，注射PG后的第3天取出CIDR，取出CIDR后24—48小时观察发情。以发情之日计为0天，在6～8天内进行胚胎移植。 1.5 胚胎移植 同期发情处理后发情牛可进行胚胎移植。胚胎移植前对受体进行直肠触检，黄体合格者用于移植。实行1～2尾椎间硬膜外麻醉，擦拭外阴部。由技术熟练的技术人员将胚胎移植到受体有黄体一侧子宫角的上1/3～1/2处。 1.6 妊娠检查 胚胎移植后45～60天对受体牛进行直肠妊检，对已妊娠的受体要加强饲养管理，避免应激反应。 1.7 数据统计 试验数据采用x2检验。 2 结果： 2.1重复排卵对奶牛人工授精妊娠率的影响 本试验对经过1～3次重复超排的14～16月龄育成荷斯坦牛自然发情后采用常规冻精人工授精使其自然繁殖，人工授精限定在3次以内，研究重复超排对人工授精妊娠率的影响。由表1可知，超排1次组、超排2次组、超排3次妊娠率分别为96.25%、91.67%、95.29%，与对照组(未超排组)妊娠率94.74%无显著差异（p0.05），表明在重复超排三次之内，超排次数的增加对育成牛人工授精妊娠率无显著影响（p0.05）a 超排1次 38 36 96.25%a 超排2次 80 77 91.67%a 超排3次 12 11 95.29%a 注:同列中上标相同差异不显著（p0.05）a 超排1～2次 66 49 31 74.24%a 63.27%a 超排3～4次 21 18 11 85.71%a 61.11%a 超排5～6次 16 14 8 87.50%a 57.14%a 注:同列中上标相同差异不显著（p0.05）。 3 讨论 3.1重复超数排卵对奶牛人工授精妊娠率的影响 重复超数排卵处理主要是通过两个方面对牛繁殖性能产生影响：一是通过繁殖内分泌系统，，，progesterone or aspiration of Ovarian follicles in Holstein in cows [J] Theriogenology, 20