抗生素效价的微生物检定法.ppt

第四章：抗生素效价的微生物检定法 授课人:汪穗福(高级讲师) 苏惠虹(助理讲师) 广州市医药中专学校 教学目标： １.解释抗生素概念、叙述医疗用抗生素特点、 了解抗生素的主要作用机制 ２.叙述抗生素的效价和单位及其表示方法 ３.熟知抗生素效价检定操作流程与基本要求 ４.述说测定原理。 第一节 概述 第二节 抗生素的效价和单位 第三节 管碟法测定操作 第四节 二剂量法 总结及作业 第一节 概述 一、抗生素的主要作用机制 １、抑制细胞壁的合成 ２、影响细胞膜的功能 ３、干扰蛋白质的合成 ４、抑制核酸的合成 二、抗生素的概念:抗生素主要是由微生物所产生的极微量便具有选择性地杀死或抑制它种生物或肿瘤、细胞生长的一类天然有机化合物。 三、医药用抗生素的特点： (1)有较大的差异毒力 ：差异毒力越强，越有利于临床应用。　 (2)抗菌活性强：MIC值越小，表示活性越强。 　 (3)抗菌谱广：广谱抗生素、窄谱抗生素 (4)不产生副作用和不良反应 四、抗生素效价微生物测定技术 （一）概述 效价测定技术方法： 1、物理、化学法：简便、快速，本身纯度不高，采用该法会引起偏差，因此只有在纯度较高情况下可采用 2、微生物法：原理和临床应用的要求相一致，直接反映出抗生素的疗效，且灵敏度较高，需用量较小，因此被广泛使用。 微生物法： 依据抗生素最小抑菌浓度而设计的稀释法；根据不同浓度的抗生素对微生物生长速度的不同影响程度而设计的比浊法；有依据抗生素渗透到含敏感菌的琼脂培养基中产生抑菌圈而设计的管碟法(又称扩散法，杯碟法或垂直扩散法)；根据对微生物呼吸抑制程度而设计的呼吸度量法；根据对微生物代谢产物的影响而设计的快速法，对微生物体内酶系统产生影响的脱氢法。 浊度法：系利用抗生素在液体培养基中对试验菌生长的抑制作用，通过测定培养后细菌浊度值的大小，比较标准品与供试品对试验菌生长抑制的程度，以测定供试品效价的种方法。 管碟法：是利用抗生素在含敏感试验菌的琼脂培养基中的球面扩散渗透作用，从而形成一定的抑菌圈。通过琼脂培养基，可观察并测量出抑菌圈的大小。在一定的抗生素浓度范围内，对数剂量(浓度)与抑菌圈的表面积或直径成正比。 （二）抑菌圈的形成 1、抑菌圈： 将不锈钢小管(俗称为牛津杯)放置在含敏感试验菌的琼脂培养基上，将抗生素溶液注入小钢管中，抗生素分子随溶剂向培养基内呈球面状放射状扩散。同时将培养基置入适宜试验菌生长的培养箱中，琼脂培养基中的试验菌开始生长。抗生素分子在琼脂培养基中的浓度，随离开小钢管的距离增大而降低，离小钢管愈远，琼脂培养基中抗生素分子愈少，相应的抗生素浓度愈低。当抗生素分子扩散到一定时间，在小钢管周围形成一个能有效的抑制试验菌生长的范围，也就是通常所说的抑菌圈。 2、影响抑菌圈大小的因素： 抑菌圈的半径(大小)与最小抑菌浓度C，琼脂层厚度H，抗生素在琼脂内扩散系数D，抗生素在小钢管中的量M，以及抗生素的扩散时间T有关：这些因素的改变，常会影响抑菌圈的大小和清晰度。 按设计原理不同分: 　　 第二节 抗生素的效价和单位 一、抗生素的效价和单位 抗生素的含量用效价和单位表示。该词有时不加区别统称为效价单位。 效价（ｐotency）：指检品的实际单位数与其标示量的比值。常表示为效价的百分数。效价是从比较检品与标准品的生物活性而得。 单位（unit,u）：是衡量抗生素有效成分的具体尺度。 二、抗生素的效价单位的表示方法 复习旧课: 1、抗生素是指主要由_____生成的————————________________________一类________化合物称之。 2、作为医疗用抗生素应具有————、————、————、————特点。 3、抗生素效价的微生物检定法常用————、————方法进行。 4、表示抗生素的效价和单位有————、————、————、————等方法。 5、中国药典规定的应用方法中2．2法中第1个与第2个2是分别表示＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿，而两个2则是分别表示＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿意思。 教学目标： 熟知抗生素效价检定操作流程与基本要求 教学重点： 抗生素效价检定操作方法与基本要求 教学难点： 抗生素效价检定