关于2植物细胞工程的理论基础.pptVIP

培养及筛选过程（在再生植株水平上）： 组织、器官、愈伤组织、原生质体等  ↓诱发变异处理 愈伤组织  ↓  再生植株  ↓筛选压 耐性植株 * * 2、间接筛选法 间接选择法是一种借助于与突变表现型有关的性状作为选择指标的筛选方法。当缺乏直接选择表型指标或直接选择条件对细胞生长不利时，可考虑采用间接筛选法。 抗病突变体的筛选也常常用间接筛选的策略。由于在离体培养中直接接种病原物会严重阻碍细胞生长，因此可以在培养基中加入一定剂量的病原物类毒素来增加选择压力。 * 体细胞无性系变异的表示方法主要有两种：（1）、Chaleff提出的以R0、R1、R2、….分别代表体细胞无性系变异的当代和自交以后的世代（2）Larkin和Scowcroft提出的SC1、RC2、RC3…..分别代表当代和自交以后的世代 * 六、体细胞无性系变异的利用 1．创造育种中间材料或直接筛选新品种 据统计，诱导突变已被用来改良诸如小麦、水稻、大麦、棉花、花生和菜豆这些种子繁殖的重要作物。在全世界50多个国家中，已培育出1000多个由直接突变获得的或由这些突变体杂交而衍生的品种。这些品种的主要特性包括品质改良、增强抗病性和抗逆性等 * 2．遗传研究突变体作为基因克隆和标记筛选具有独特的优点。因为突变一旦发生，即可在表现型上与供体显著不同，通过差异显示或分子杂交筛选，即可快速获得突变位点的DNA序列，经过测序与功能鉴定，就可能获得与突变性状相关的基因。即使通过分析不能获得功能基因，这些DNA序列也可作为与突变性状相关的分子标记，用于相关遗传研究。突变体用于基因克隆和功能鉴定早已成为模式植物如拟南芥等的常规方法，近年来也已开始广泛用于其它作物中。特别是与转座子标签插入突变技术相结合，更显现出这一途径的高效性。目前，利用突变体策略已分离出一些功能基因和抗病基因，如玉米乙醇脱氢酶基因ADH，赤霉素合成相关基因GA1、GA4，生长素敏感性基因AUX1、AUX2、番茄抗病基因Df9等。 * 3．发育生物学研究植物的个体发育是一个渐进过程，每一个器官和组织的分化都是一个复杂的调控过程。利用体细胞突变策略对植物发育的基因调控研究取得了突破性进展。特别是利用拟南芥和金鱼草等模式植物，已分离出一大批不同发育阶段和组织类型的突变体，包括顶端分生组织、根、开花转变、花序、花分生组织、胚胎发育等的一系列突变体。通过对这些突变体的研究，不仅建立了器官发育模式，而且分离鉴定了一大批与发育有关的基因，包括维持正常发育状态的基因、促进发育进程的基因，以及相关修饰基因  * 4．生化代谢途径研究 生物的各种代谢活动涉及到一系列酶相关基因的表达。如果某一代谢过程的关键酶基因突变，则会影响到下游代谢链的正常进行。因此，突变体作为代谢活动调控研究的工具，具有十分便利和高效的优势。 * 七、变异的抑制在脱毒苗生产、快速繁殖等工作中，变异往往会影响产品的产量和质量。所以，应采用一定的方法避免变异。  * 抑制变异可从以下几点考虑： 1、利用比较稳定的品种材料。 2、利用茎尖、幼胚等再生能力较强 的组织进行培养。 3、 避开使用高浓度激素。 4、不经过愈伤组织，而直接从脱分 化细胞再生。 5、尽量促使植株早再生，使培养时 间缩短。 * 黑暗条件下培养的烟草愈伤组织 ；菠萝的愈伤组织； * 树的发达的愈伤组织 * 决定：早期在动物发育研究中使用这一概念 * 一般认为，芽和茎原基通常起源于培养组织中比较表层的细胞，即外起源，而根原基则发生在组织较深处，是内起源。 * 三.影响器官分化的因素 1.外植体- 位置、状态及组织类型（芦荟、小麦） 外植体的状态和组织类型影响诱导和分化的难易； 外植体的部位直接影响器官分化的类型。 例如：芦荟 * * * 具有变态器官（如鳞茎、球茎、块茎等）的植物，在培养中往往也容易形成相应的变态器官，如百合、水仙等鳞茎类植物培养中往往易形成小鳞茎；草石蚕、马铃薯等块茎植物培养中则可观察到块茎的形成。这一特性也使以变态器官为繁殖体的植物实现实验室工厂化生产种子提供了可能。 * 草石蚕 水仙 百合 * 2.生长调节剂 生长调节剂在细胞生长与个体发育中具有重要的调控作用。离体培养下的器官分化在大多数情况下是通过外源提供适宜的植物生长调节剂来实现的。种类、浓度和不同类型生长调节剂的比例是影响根芽等分