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一种运用复合病因造模法复制大鼠肝郁脾虚证 模型的研究1 李艳彦，谢鸣，陈禹，王洪海 北京中医药大学国家重点学科方剂学学科（100029，北京） 摘 要：目的：探讨一种新的复合造模方法建立中医肝郁脾虚证大鼠模型。方法：大鼠采用 慢性束缚应激＋过度疲劳＋饮食失节，连续三周，自然恢复一周。观察造模期间各不同时间 点的大鼠外观表征、尿D －木糖排泄率、脑单胺类递质及血中胃肠激素的变化。结果：与 正常组比较，模型大鼠在造模第二周至第三周出现明显的饮食减少、大便溏薄、活动减少、 倦卧、情绪低落等改变，第四周未见明显恢复；模型大鼠尿D －木糖排泄率在第二、三、四 周显著降低(P<0.05 或P<0.001)；海马5-羟色胺 （5-HT ）第二周显著降低(P<0.001) ，但于第 三、四周回升(P<0.05 或P<0.01) ，去甲肾上腺素 （NE ）第三、四周降低(P<0.01 或P<0.05) ， 多巴胺（DA ）无明显变化；血浆生长抑素（SS ）、血清胃泌素（GAS ）于第三、四周显著 升高(P<0.01 或P<0.05)；血浆胃动素（MTL ）于第二、三周显著降低(P<0.05) ，第四周显著 升高并高于正常对照组 （P ＜0.001 ）；血浆血管活性肠肽 （VIP ）于第三、四周显著降低，第 三周显著低于正常对照组（P ＜0.001 ），第四周显著高于正常对照组（P ＜0.05 ）。结论：大 鼠造模三周外观表现出部分类似肝郁脾虚证，体内存在有胃肠吸收及运动功能障碍和脑单胺 递质代谢的紊乱，停止造模后一周内上述改变未见明显恢复。该模型基本符合中医肝郁脾虚 证的一些特征。 关键词：肝郁脾虚证；动物模型；大鼠；复合造模法 中医证候动物模型的复制在中医基础研究中具有重要的作用。肝郁脾虚是中医临床最常 见的证型。本文根据中医病因发病学原理，参考目前肝郁证模型的慢性束缚应激法[1]和脾 虚证模型的过度劳累加饥饱失常法[2，3]，首次用慢性束缚应激＋过度疲劳＋饮食失节的复 合方法复制中医肝郁脾虚证大鼠模型，并探察该模型的某些生物学特征。 1 材料 1.1 动物：健康雄性 Wistar 大鼠，体重 （220 ±10）g，级别 SPF/VAF ，动物许可证号为 SCXK （京）2002-0003，由北京维通利华实验动物中心提供。所有动物提前一周购入，5 只 ／笼。 光照节律 12L ∶12D （6:00～18:00），室温(20±2)℃，保持安静。 1.2 造模用束缚筒： 自制。束缚筒为有机玻璃制成的圆筒状结构，主筒长 25 厘米，筒口 外经 7 厘米，内径 5 厘米；前端置有一直径小于主筒的、可以前后调节的带有透气孔、便于 大鼠头伸进的有机玻璃前罩，后端为可调的开关闸门。 1.3 试剂：D-木糖试剂盒，由南京建成生物工程研究所提供；MTL-RIA 试剂盒、GAS-RIA 试剂盒，由解放军总医院东亚放免研究所提供；SS-RIA 试剂盒由北京华英生物技术研究所 提供；VIP-RIA 试剂盒，由海军放免技术中心提供。 1.4 主要仪器：LGJ — 10 冷冻干燥机，北京四环科学仪器厂造；电动吸引器和 YB ·DX30/0.093A 型－膜片，天津市医疗机械二厂产；低温离心机 （DDL—5 型），上海安 1本课题为国家 211 项目基金资助课题。 通讯作者：谢鸣，医学博士，北京中医药大学国家重点学科教授，01064286992 ；E-mail ： xieming603@263.net 。 -1- 亭科学仪器厂产；SN—695B 型智能放免γ测量仪，上海核所日环光电仪器有限公司产。 2 方法 2.1 制模方法 采用慢性束缚应激＋过度疲劳＋饮食失节的方法。实验前全部动物进行预游泳，剔除游 泳时间少于 10 分钟、大于 20 分钟的大鼠。 造模：合格造模大鼠于每天上午 8：00 置于束缚盒中限制 3 小时，下午 2 ：00 置于盛有 温水