液态淋浇食醋生产中产膜菌的分离及菌膜组分研究.pdfVIP

第l6卷第1期 纤 维 素 科 学 与 技 术 、，01．16 NO．1 2008年3月 Journal of Cellulose Science and Technology M缸 2008 文章编号：1004—8405(2008)01·0020·05 液态淋浇食醋生产中产膜菌的分离及菌膜组分研究 张永凤 ， 卢红梅 ， 张凤娟 ， 何绪晓 ， 邓振坤 (1．贵州大学 贵州省发酵工程与生物制药重点实验室，贵州 贵阳 550003； 2．河南科技学院 信息工程学院 计算机科学系，河南 新乡 453003； 3．贵州大学 生命科学学院 食品科学系，贵州 贵阳 550003； 4．苏州民惠食品有限公司，江苏 苏州 215124) 摘 要：取贵州省贵阳市味莼园食品有限公司液态淋浇食醋生产中长膜发酵罐中的 填充料玉米芯，在实验室条件下分离出一株产膜菌 Yz2。研究结果表明该菌所产凝 胶膜的主要成分是细菌纤维素。 关键词：产膜菌；分离；细菌纤维素 中图分类号：Q936 文献标识码：A 液态淋浇食醋发酵生产具有投资小，生产周期短，耗电低，操作简单，占地面积小， 易于实现管道化生产等诸多优点。但淋浇发酵塔在使用一段时间后，塔内形成一层皮革状 凝胶膜，影响空气流动和醋液的淋浇回流，抑制醋酸菌的生长，同时消耗酒醪中的养分， 并将醋酸氧化分解，产酸速率明显降低。经过长期的循环生产，当菌膜长到一定程度，会 堵死填充料间的缝隙，使发酵液不能正常循环，甚至醋酸发酵会因缺氧而终止。必须进行 填充料更换，而填充料更换不仅费时、费工，增加生产成本，还污染环境。目前国内外食 醋液态淋浇发酵生产中普遍存在这种有害现象，是影响液态淋浇食醋发酵生产不能长期进 行循环生产的主要因素【l1。 为此，取贵州省贵阳市味莼园食品有限公司液态淋浇食醋生产中长膜发酵罐中的填充 料玉米芯，在实验室条件下进行产膜菌的分离，并研究此菌膜的主要成分。这对液态淋浇 食醋生产中菌膜产生机理和防治的研究具有重要意义。 1材料与方法 1．1材料 1．1．1分离样品 贵州省贵阳市味莼园食品有限公司液态淋浇食醋生产中长膜发酵罐中的填充料玉米芯。 1．1．2 主要培养基 1．1．2．1 分离和斜面保藏培养基 1 葡萄糖2 g，蛋白胨 0．5 g，酵母粉 0．5 g，柠檬酸 0．1 g，Na2HPO4 0．5 g，琼脂2 g， 水100 mL，pH 6．0。121℃灭菌 20 min，然后加入0．1％经50~C活化30 min的酸性纤维素酶。 收稿日期：2007．08．04 $通讯作者 作者简介：张永凤 (1979~)，女，汉族，硕士研究生，主要从事食品微生物的研究。 第l期 张永风等：液态淋浇食醋生产中产膜茵的分离及茵膜组分研究 2l 1．1．2．2 液体发酵培养基【。】 蔗糖2 g，酵母膏O．5 g，蛋白胨O．3 g，KI-I2PO4 0．2 g，MgSO4 0．01 g，水100 mL，pH 5．5～ 6．0，12l℃灭菌20 min。 灭菌后加入20％灭过菌的糖茶水 (3％茶叶+20％蔗糖)，1．5％酒精，l％醋酸。 1．2 实验方法 1．2．1 产膜菌的分离纯化 1．2．1．1菌种的分离 取贵州省贵阳市味莼园食品有限公司液态淋浇食醋发酵生产中长膜发酵罐中的填充料 玉米芯，在液态发酵培养基中进行富集培养。取l mL长膜的富集培养液分别稀释至l旷 ～ 10培(体积分数)，分别吸取后三个稀释度的稀释液O．1～O．2 mL于固体平板培养基上，立即 用无菌涂布棒涂布平板。然后倒置在3O℃恒温培养箱内，培养6天左右。重复上述操作， 直至平板出现单菌落。挑取单菌落接入斜面培养基，3O℃培养2天。再将斜面菌种接入液 体发酵培养基中，3O℃、120 r／min恒温摇床培养12 h，之后置3O℃恒温培养箱内培养，观 察是否有菌膜产生。 1．2．1．2 菌种的纯化 用接种环挑取在液体发酵培养基中产膜斜面菌种，按“1．2．1．1”同样的方法稀释涂平板，