2016年高中生物人教版选修三教师用书12基因工程的基本操作程序.docVIP

　　一、基因工程的基本操作程序 基因表达载体的构建 　　　　　 二、目的基因的获取 1．目的基因 主要是编码蛋白质的结构基因，也可以是一些具有调控作用的因子。 2．目的基因的获取方法 (1)从基因文库中获取目的基因。 基因文库 a．含义：将含有某种生物不同基因的许多DNA片段，导入受体菌的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因，称为基因文库。 b．种类 (2)利用PCR技术扩增目的基因。 PCR含义：是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术，全称是多聚酶链式反应。 PCR原理：DNA双链复制。 扩增过程 变性：目的基因DNA受热变性后解为单链 　↓ 复性：引物与单链相应互补序列结合 　↓ 延伸：在DNA聚合酶作用下延伸子链 (3)人工合成法：适于合成基因较小，且核苷酸序列已知的目的基因。 三、基因表达载体的构建——基因工程的核心 1．基因表达载体的功能 (1)使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代。 (2)使目的基因能够表达和发挥作用。 2．基因表达载体的组成 四、将目的基因导入受体细胞 1．转化 目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。 2．导入过程 (1)导入植物细胞 方法 (2)导入动物细胞 (3)导入微生物细胞 方法：用Ca2＋处理细胞，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态(这种细胞称为感受态细胞)。 受体细胞：原核细胞(使用最广泛的是大肠杆菌细胞)。 原核生物的特点：繁殖快，多为单细胞，遗传物质相对较少等。 五、目的基因的检测与鉴定 1．分子水平的检测(连线) 2．个体水平的鉴定 (1)抗虫或抗病的接种实验。 (2)对基因工程产品与天然产品的功能进行活性比较。  一、目的基因的获取 阅读教材P8～10，观察分析图1－6,1－8，探讨下列问题： 1．获取目的基因的方法有哪些？ 提示：有从基因文库中获取，PCR技术扩增和人工合成三种方法。 2．联系DNA复制，比较PCR技术与DNA复制的不同点(填写下表)。 DNA复制 PCR技术 解旋方式 ________催化 DNA在________作用下变性解旋 场所 ________(主要在________内) ________(主要在________内) 酶 ________、普通的________等 耐热的________(Taq酶) 温度条件 细胞内________条件 需控制温度，在较高温度下进行 合成的对象 DNA分子 DNA片段或基因 提示：解旋酶　高温　细胞内　细胞核　细胞外　PCR扩增仪　解旋酶　DNA聚合酶　DNA聚合酶　温和 二、基因表达载体的构建 阅读教材P11，观察分析图1－10，探讨下列问题： 1．基因工程的核心是哪一步操作？其目的是什么？ 提示：基因表达载体的构建是基因工程的核心，其目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能够表达和发挥作用。 2．如图是基因表达载体模式图，请回答下列问题： (1)分别写出①②③④⑤各代表什么。 提示：①启动子，②终止子，③标记基因(抗生素抗性基因)，④复制原点，⑤目的基因(插入基因)。 (2)图中①②③各有什么作用？ 提示：①启动子：一段有特殊结构的DNA片段，位于基因首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，负责驱动目的基因转录出mRNA。②终止子：起终止转录的作用。③标记基因(抗生素抗性基因)：作用是检测受体细胞中是否有目的基因，并将含有目的基因的细胞筛选出来。 (3)启动子和终止子与起始密码子和终止密码子是一回事吗？ 提示：不是一回事，启动子和终止子位于DNA上，是基因表达必需的部分。而起始密码子和终止密码子位于mRNA上，决定翻译的开始和结束。 3．尝试利用流程图表示如何构建基因表达载体。 提示： 三、将目的基因导入受体细胞 阅读教材P11～13内容，探究下列问题： 1．将目的基因导入不同种类生物所选用的方法是否相同？常选用的受体细胞是什么？ 提示：不相同。常选用的受体细胞及导入方法如下表： 生物种类 植物细胞 动物细胞 微生物细胞 常用方法 农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法 显微注射技术 Ca2＋处理法 受体细胞 体细胞 受精卵 原核细胞 2.根据图示简述目的基因在受体细胞中的位置不同会引起遗传上的差别吗？ 提示：图中②会使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达，原因是在进行细胞减数分裂时，细胞核上的DNA经复制后平均分配到两个子细胞中，保证了亲子代遗传性状的稳定性，而①细胞减数分裂时，细胞质是不均分的，子细胞不一定含有目的基因。 四、目的基因的检测与鉴定 阅读教材P13～15有关内容，仔细观察分析图1－14、1－15，自主完成以下问题： 1．如何检测目的基因在真核生物中稳定遗传？ 提