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100株结核分枝杆菌耐药情况研究
100株结核分枝杆菌耐药情况研究【摘要】目的了解当前结核病对一线抗结核药物的耐药水平及耐多药的情况,为结核病的临床治疗与控制提供参考依据。方法采用WHO推荐的药敏比例法对100株临床分离结核分枝杆菌进行药物敏感性试验。结果总耐药率为20%,多重耐药率为9%,对SM的耐药率最高,达到14%。结论结核病的耐药趋势严峻,相关卫生部门应引起重视。
【关键词】分枝杆菌;结核病;耐药性
近年来,由于抗结核化学药物的不规范和不规则使用,全球结核病疫情出现恶化趋势。耐药结核分枝杆菌的出现,特别是多重耐药结核分枝杆菌感染是造成结核病全球流行的一个重要原因。加强对结核病耐药性的分析和监测具有重要的临床意义,为深入了解深圳市龙岗区结核分枝杆菌的耐药性状况,对肺结核病患者中分离的结核分枝杆菌进行耐药性分析,现报告如下。
1材料
1.1菌株来源自未曾接受任何抗结核药物治疗或用药时间少于1个月的肺结核病患者痰标本中分离的100株结核分枝杆菌。
1.2抗结核药物耐药性分析试验中采用4种抗结核药物。
2方法
2.1分离培养取临床初次就诊患者痰标本,经齐-尼抗酸染色法镜检为阳性,采用酸性改良罗氏培养基进行结核分枝杆菌分离培养。
2.2药敏试验采用世界卫生组织/国际防痨和肺病联合会(WHO/IUATLD)推荐的比例法,分别对异烟肼(INH)、利福平(RFP)、链霉素(SM)、乙胺丁醇(EMB)进行药敏试验。4种含药培养基的临界药物浓度分别为0.2、40、4 、2 μg/ml。所用菌液浓度为10.2、10.4 mg/ml,分别取0.01 ml接种于含药及对照培养基,37 ℃培养4周后观察,计数培养基上菌落生长情况。试验所用对照和基础培养基为无淀粉改良罗氏培养基。耐药性以在临界药物浓度生长菌落的百分数来表示,即试验管(含药培养基)菌落数与对照管(不含药培养基)菌落数之比>1 %为耐药[1]。
2.3质量控制阳性对照菌株用对硝基苯甲酸(PNB)和噻吩二羧酸肼(TCH)进行人型、牛型结核分枝杆菌与非结核分枝杆菌的菌种鉴定。质量控制以高稀释度菌液(10.4 mg/ml)在对照培养基上生长的菌落数少于20株,则取对照管传代培养,进行重复试验。
3结果
3.1耐药性测定结果临床分离的100株结核分枝杆菌中,耐药20株,总耐药率为20%。分离自初治患者的95株菌中,耐药17株,耐药率为17.9%;分离自复治患者的5株菌中,耐药3株,耐药率为60%,初治和复治患者的耐药率差异显著。 3.2耐药率顺位20株耐药结核分枝杆菌对4种抗结核药物的耐药率由高到低依次为:SM(14%)、INH(11%)、RFP(7%)、EMB(5%),见表1。
3.3多重耐药率20株耐药结核分枝杆菌中,同时2种及以上药物耐药的多重耐药9株,多重耐药率9%(9/100)。
4讨论
耐药性结核是当前结核病防治工作中急需解决的问题之一,尤其是多重耐药性结核病受到了广泛的关注。耐药株的不断产生和流行,导致结核病的患病率和死亡率居高不下[2]。对结核分枝杆菌耐药性的分析是结核病监测的重要组成部分。本次药敏分析结果显示,耐药现象仍然严重,总耐药率为20%,远高于发达国家初始耐药率5%的水平。应进一步加强结核病的防治工作,强化医务人员直接督导下服药的管理模式(DOTS),以减少耐药患者的出现概率。在耐药的顺位比较中,对SM与INH的耐药率较高,这可能与上世纪以链霉素和异烟肼作为肺结核病患者化疗的主要一线抗菌素有关[3]。本次分析结果表明,深圳市龙岗区的多重耐药现象,特别是获得性耐多药应该引起高度重视。与全省(15.7%)相比虽然有所下降,但不能忽视其潜在的危险性,多重耐药已成为限制我国结核病控制工作开展主要的因素[4]。
为减少耐药菌株的产生和传播,使结核病患者能得到早期、联合、规范的治疗,应进一步采取有力措施减少和防止耐药结核病的发生。选择合适的药敏试验,如通过分子生物学手段进行基因检测[5],分析结核分枝杆菌的耐药性,并根据药敏试验结果选择抗结核治疗方案,避免多重耐药结核患者的产生,从而有效控制结核病的传播。
参 考 文 献
1World Health Organization. Guidelines for Surveillance of Drug Resistance in Tuberculosis. WHO, Geneva 1996.
2钟球, 钱明, 李建伟. 广东省WHO结核病耐药监测研究. 中国防痨杂志, 2000, 23(1): 5-8.
3沈秀萍, 徐瑞兴, 吕晶. 北京市西城区新发肺结核病人起始耐药性监测. 中国防痨杂志, 1999, 21: 17-19.
4刘剑君, 姜世闻, 成
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